3-4基因工程制药课件.pptVIP

（六）基因工程菌的遗传不稳定性及其对策 基因工程菌遗传不稳定性的表现与机制 改善基因工程菌不稳定性的策略 基因工程菌遗传不稳定性的表现与机制 工程菌遗传不稳定性的表现形式 基因工程菌的遗传不稳定性主要表现在重组质粒的不稳定性，这种不稳定性具有下列表现形式： 结构不稳定性：重组DNA分子上某一区域发生缺失、重排、修饰，导致其生物学功能的丧失 分配不稳定性：整个重组DNA分子从受体细胞中逃逸（curing） 宿主细胞突变 1.缺失突变引起的质粒不稳定性：现已观察到在许多质粒DNA中存在着自发缺失的现象；人工构建的具有多个串联启动子的质粒载体特别容易发生缺失作用。 *2.重组作用引起的质粒不稳定性：①一方面存在质粒载体位点之间的同源重组；②另一方面大肠杆菌寄主染色体与质粒载体上的IS因子或转位因子，同样也会引起结构的不稳定性。这是由于通过IS序列和转位因子的插入作用、邻位缺失或DNA倒位，都有可能使质粒载体产生自发突变。 基因工程菌遗传不稳定性的表现与机制 工程菌遗传不稳定性的产生机制 受体细胞中的限制修饰系统对外源重组DNA分子的降解 外源基因的高效表达严重干扰受体细胞正常的生长代谢：能量、物质的匮乏和外源基因表达产物的毒性诱导受体细胞产生应激反应：关闭合成途径，启动降解程序 重组质粒在受体细胞分裂时的不均匀分配：这是重组质粒逃逸的基本原因 受体细胞中内源性的转座元件促进重组