桂龙风湿巴布贴治疗风湿性关节炎的实验讨论_0.docVIP

桂龙风湿巴布贴治疗风湿性关节炎的实验讨论 　　风湿性关节炎属中医痹症范畴, 该疾患中医治疗以祛风通络, 活血止痛为主, 内服和外用法均有较好疗效。为进一步评价桂龙风湿巴布贴的主要药效学, 即为临床使用提供依据, 开展试验结果报告如下。 　　1　资料与方法 　　1. 1　实验药物与试剂 　　桂龙风湿巴布贴由中药材桂枝10 g、细辛5 g、川乌10 g、草乌10 g、威灵仙10 g、蒲黄10 g、肉桂5 g、羌活10 g、五爪龙15 g、海桐皮15 g 经过中药制剂提取制备, 试验时按上述处方制备药液稀释成含生药3 g/ml。 　　1. 2　动物 　　SD 大鼠, 雌雄各半, 体重160~180 g, 由广东省实验动物中心提供。 　　1. 3　方法 　　桂龙风湿巴布贴对大鼠佐剂性多发性关节炎具有抑制作用, 选用SD 大鼠50 只分为模型对照组、可的松组、高剂量组、中剂量组、低剂量组, 每组10 只。用Freund 完全佐剂致炎, 从致炎前2 天给药, 方法为：桂龙风湿巴布贴按1.0、2.0、4.0 g/kg 剂量将桂龙风湿巴布贴按每100 克动物体重取0.1 ml 滴在药棉上包敷致炎足, 保持3 h, 1 次/d ;以赋形剂为模型对照组, 阳性对照选用皮下注射氢化可的松25 mg/kg, 1 次/2 d, 致炎后第21 天各组动物停药, 后续观察3 d。 　　1. 4　观察指标 　　容积法测量原发性致炎足及继发性对侧足致炎前后体积, 计算肿胀度。肿胀度=( 致炎后体积- 致炎前体积)致炎前体积times;100%。 　　1. 5　统计学方法 　　采用SPSS19.0 统计学软件处理数据。计量资料以均数plusmn; 标准差( x-plusmn;s) 表示, 采用t 检验。Plt;0.05表示差异有统计学意义。 　　2　结果 　　桂龙风湿巴布贴不同剂量组能显著降低致炎后不同时间(3 h、7、14、21 d) 致炎足肿胀度, 并能显著降低致炎后不同时间(7、12、18、21 d) 致炎足肿胀度, 分别与模型对照组比较差异有统计学意义(Plt;0.05)。 　　3　讨论 　　禾肾丸对阿霉素肾病大鼠肾组织PI3K 及PTEN 蛋白表达的影响 　　蛋白尿是慢性肾脏疾病肾损害进展的最重要危险因子之一，蛋白尿的程度与肾脏病预后密切相关，随着蛋白尿的增加，肾脏病变逐渐加重。尿蛋白对近端肾小管细胞、系膜细胞及足细胞均有毒性作用，最终表现为肾小球硬化症或肾小管间质纤维化，因此控制蛋白尿也就成为慢性肾脏病治疗的重要靶点。磷酯酰肌醇3 激酶( phosphoinositide-3-kinase，PI3K) 在糖尿病肾病( DN) 、狼疮性肾炎、多囊肾、肾脏缺血再灌注损伤等疾病的发病机制、诊断及治疗等方面的作用日益受到重视。禾肾丸是何泽云教授根据《金匮要略·血痹虚劳脉证并治第七》篇中薯蓣丸和《医方集解》中金锁固精丸化裁加山药、大枣、糯米而制成的中药制剂。本研究拟采用阿霉素肾病模型，观察禾肾丸对肾病模型大鼠肾脏PI3K 及人第10 号染色体缺失的磷酸酶( PTEN) 蛋白表达的影响，旨在探讨禾肾丸对阿霉素肾病大鼠肾小球足细胞的保护作用。 　　1 材料与方法 　　1. 1 实验材料 　　1. 1. 1 动物 　　健康SD 雄性大鼠100 只，体质量( 170 plusmn; 10) g，购于湖南斯莱克景达实验动物有限公司。动物合格证号: SCXK( 湘) 2011-0003。实验动物饲养于湖南中医药大学第一附属医院中心实验室，分笼饲养，每笼不超过5 只，自由饮水和摄食，饲养室温度( 24 plusmn; 2) ℃，湿度( 50 plusmn; 3) %，每只大鼠均予编号登记管理。 　　1. 1. 2 药物 　　阿霉素( 注射用盐酸多柔比星，ADR) ，10 mg /支，浙江海正药业股份有限公司生产( 国药准字 ; 依那普利，10 mg /片，江苏扬子江有限公司生产; 禾肾丸，60 g /瓶，湖南中医药大学第一附属医院院内制剂。禾肾丸组成: 怀山药100 g、建莲子100 g、沙苑蒺藜100 g、醋炙牡蛎50 g、醋炙龙骨50 g、芡实50 g、大枣肉50 g、黄柏20 g、糯米50 g; 禾肾丸悬液配置方法: 加水2 000 ml，煮30 min，取上清汁。禾肾丸60 kg 体质量的成人每日剂量为18 g，根据体表面积计算公式，换算成大鼠剂量为0. 4 mg·g - 1·d - 1 ; 依那普利60 kg 体质量的成人每日剂量为10 mg，换算成大鼠剂量约为0. 4 mg·g - 1·d - 1。药液均用蒸馏水稀释配置，每次配置后予保鲜膜封口后保