第8章快繁和脱毒讲义.ppt

特点： 热处理方法主要缺陷是并非能脱除所有病毒。 例如在马铃薯中，应用这项技术只能消除卷叶病毒。 因此热处理需与其他方法配合应用，才可获得良好 的脱毒效果 。 （二）组织培养脱毒-珠心组织脱毒 病毒是通过维管组织传播的，而珠心组织和维管束系统无直接联系，因此可以通过珠心组织离体培养获得无病毒植株。 如柑橘、葡萄通过珠心离体培养获得了无病毒植株。 （三）无病毒苗的利用 无病毒苗在生产中也要防止病毒的再感染。 生产场所应隔离病毒感染途径，做好土壤消毒或防蚜等工作。在此种植区及种植规模小的地方，要较长时间才会感染。而在种植时间长、轮作及种植规模大的产地则在短期内就可以感染。 四、无病毒苗的效果 无病毒苗可以表现出明显的优良效果。 如草莓可增产20％~50％，植株结果多，单果重增加，上等果比例提高。菊花切花品种的脱毒株，表现出株高增加，切花数增多，花朵大，切花较重等特点。 复习思考题 1. 植物脱毒培养的意义是什么？ 2. 简述植物茎尖脱毒和热处理脱毒的原理与方法 3. 脱毒植物鉴定方法有哪几种？ (三)、无病毒苗培育的意义 1.去除病毒危害，提高作物品质与产量 采用生物、物理、化学等途径防治病毒病收效甚微，甚至 毫无成效。而通过组织培养的方法可以脱除严重患病毒植 物的病毒种类，提高产量、质量。因此，到60至70年代在 花卉、蔬菜和果树等得到广泛的应用。 2. 减少环境污染，有利于保护环境 栽培去病毒植物可减少药剂的使用 二、无病毒苗培育的方法 （一）热处理脱毒 （二）组织培养脱毒法 （三）其他途径脱毒 （一）热处理脱毒 1.发现： 1889年印度尼西亚爪畦人发现，患枯萎病的甘蔗(现证明为病毒病)，放在50-52℃的热水中保持30min，甘蔗就可去病生长良好。以后此方法被广泛用于防治许多植物的病毒病。 热处理又称温治疗法。 2.原理 是当植物组织处于高于正常温度的环境中时，组织内部的病毒受热后部分或全部钝化，不能生成或生成病毒很少，以致病毒含量不断降低从而达到脱毒的目的 。 3.热处理方法 （1） 温汤浸渍处理 适用：休眠器官、剪下的接穗或种植的材料 方法：50℃左右的温水中浸渍10min至数小时 特点：方法简便易行，但易使材料受伤。 （2） 热空气处理 适用：对活跃生长的茎尖效果较好 方法：将生长的盆栽植株移人温热治疗室(箱)内， 一般在35~40℃下处理几十分钟至数月。处理时间 因植物而异，如香石竹于38℃下处理两个月，其茎 尖所含病毒即可被清除。马铃薯在35℃下处理几个 月才能获得无病毒苗。 （二）组织培养脱毒-微茎尖培养脱毒 1.微茎尖培养脱毒原理 感染病毒植株的体内病毒的分布不均匀，病毒的数量随植株部位及年龄而异，越靠近茎顶端区域的病毒的感染程度越低，生长点(分生组织约0.1~1.0mm区域)则几乎不含或含病毒很少。 茎尖培养脱毒，由于其脱毒效果好，后代稳定，所以是目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径。 茎尖或生长点含病毒低的原因 ①在植物体内，病毒易于通过微管系统移动，但分生组织中无此系统；病毒在细胞间移动的另一个途径是通过胞间连丝，但它的速度极慢，难以赶上活跃生长的茎尖。 ②活跃生长的茎尖分生组织代谢活性很高，致使病毒无法复制。 ③若植物体内存在病毒钝化系统，它在分生组织中比在任何其它区域都有更高的活性而钝化病毒，使分生组织不受浸染。 ④茎尖分生组织存在较高水平的内源生长素，可抑制病毒的增殖。 2.微茎尖培养方法 外 植 体 茎尖 （shoot tip） 茎的顶端分生组织 （apical meristem） 顶端分生组织及其下方1—3个幼叶原基构成 茎的最幼龄叶原基上方的一部分，最大直径约100um,最大长度约250um 2.1外植体的预处理 将带幼叶的茎芽叶片在75％酒精中浸蘸数秒钟（叶片包被严紧的芽，如菊花、兰花）或用0．1％次氯酸钠表面消毒l0min（叶片包被松散的芽，如香石竹，蒜和马铃薯等）。 2.2 茎尖的剥离与接种 在解剖镜下，将灭菌的外植体放在一个衬有无菌湿滤纸的培养皿内（防止茎尖变干 ），用解剖针将叶片和叶原基剥掉，当一个闪亮半圆球的顶端分生组织充分暴露出来之后，用解剖刀片将分生组织切下来，可带1~2枚幼叶，然后将其接种到培养基上。 注意：剥离与接种尽量要快，以防茎尖变褐死亡。 3.培养基 培养基：一般以White、Morel和MS作为基本培养基， 尤其是提高钾盐和铵盐的含量会有利于茎尖的生长。 植物激素：其种类与浓度对茎尖生长和发育具有重 要的作用。 适当提高生长素(0.1～0.5 mg/L)与细胞分裂素的浓度