肠出血性大肠杆菌课件.pptVIP

提纲 大肠杆菌病原学 大肠杆菌的致病 大肠杆菌引起腹泻的临床表现 德国肠出血性大肠杆菌O104:H4暴发疫情菌株特点 EHEC O104:H4检测技术流程 大肠杆菌生物学性状 大小为(0.4~0.7)μm×(1~3)μm,革兰氏染色阴性杆菌，大多有周身鞭毛，有菌毛，无芽孢。 触酶阳性，氧化酶阴性，可将硝酸盐还原至亚硝酸盐。 能发酵葡萄糖等多种糖类，如乳糖，产酸产气，硫化氢阴性，动力阳性。 大肠杆菌抗原结构 菌体O抗原（超过170种） 耐热，存在于细胞壁脂多糖层。 鞭毛H抗原（超过56种） 不耐热，存在于鞭毛蛋白。 荚膜K抗原（超过100种） 位于O抗原外围，能阻止O抗原凝集，60℃，30min可以去除。 大肠艾希氏菌血清型的表达方式按O：K：H排列 毒力基因/抗原特异性基因PCR检测方法 9、fliC (H4) fliC-5： fliC-6: 5’-TGA GTG ACC AGA CGA TAA CAG GG-3’ 5’-GGA CGA TTA GTG GGT GAA ATG AGG-3’ M fliC PCR反应体系(20μl)： 10×PCR Buffer (含Mg2+ ) fliC-5 引物 (10μM) fliC-6引物 (10μM) dNTPs (10mM) Taq DNA聚合酶 (5U/μl) DNA模板 dH2O PCR反应条件： 94℃ 3min 94℃