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郑州轻工业学院
本科毕业设计(论文)
题 目 烟草中氨基酸的分离与分析方法研究
学生姓名 陈晓
专业班级 应用化学06-1班
学 号 200604040104
院 (系) 材料与化学工程学院
指导教师(职称) 贾春晓(教授)
完成时间 2010年 6 月5日
目 录
摘 要 I
ABSTRACT II
前 言 1
1 实验部分 2
1.1 实验材料、试剂及仪器 2
1.1.1 实验材料 2
1.1.2 所用试剂与仪器 2
1.2 相关溶液的配置 4
1.2.1 盐酸的配置 4
1.2.2 衍生化试剂的配制 4
1.2.3 10﹪甲醇-水溶液 4
1.2.4 AccQ·Tag 缓冲溶液 5
1.2.5 60﹪乙腈--水 5
1.2.6 标准溶液 5
1.2.7 BF08二号样 5
1.2 实验原理 6
1.2.1 高效液相色谱法分析的原理及特点 6
1.2.2 AccQ?Tag 方法的原理 10
1.3 实验方法 12
1.3.1 原料的预处理 12
1.3.2 HPLC分析条件 12
1.3.3 柱前衍生 13
2 结果与讨论 15
2.1 水解烟叶中游离氨基酸所用盐酸浓度的确定 15
2.2 色谱条件优化 15
2.2.1 仪器条件 15
2.2.2 样品的稀释浓度的确定 15
2.3烟叶中氨基酸的定性分析 16
2.4 烟叶中氨基酸的定量分析 20
2.4.1 氨基酸标准曲线的绘制 20
2.4.2 烟叶中氨基酸的定量分析 25
2.4.3 氨基酸含量的对比分析 29
结 论 31
致 谢 33
参考文献 34
附 表 36
烟草中氨基酸的分离与分析方法研究
摘 要
烟草中的氨基酸是重要的致香前体物质 ,同时也是合成烟碱、多酚等有关物质的前提,对烟株体内氮的代谢及烟叶品质具有重要作用。本实验研究两种黑龙江白肋烟BF08和C2F不同工艺处理的烟丝中游离氨基酸种类和含量的变化,为白肋烟的进一步应用研究提供较丰富的基础数据,同时对白肋烟的加工工艺参数的调整有着积极的指导意义,有利于选择优良的工艺条件。
采用0.1M盐酸溶液水解、Waters AccQ?Fluor 衍生剂柱前衍生法处理烟样,其中氨基酸种类及含量用反相高效液相色谱法(Waters AccQ·Tag C18柱氨基酸分析柱),外标法做标准曲线,16种氨基酸可以准确定性并进行了定量测定。
实验结果表明,所建立的定量分析方法相对标准偏差小于10 %, 线性相关系数大于0.99, 方法检测限为:0.1pmol。该法采用的标准曲线有良好的线性关系,各种氨基酸的分离效果较好,方法的精密度高。用AccQ柱前衍生反相高效液相色谱法测定氨基酸的含量,简单快速,结果准确、可靠。
关键词 高效液相色谱/氨基酸/白肋烟/柱前衍生
SEPARATION ANDANALYSIS METHOD
OF AMINO ACIDS IN TOBACOO
ABSTRACT
Amino acids in tobacco is an important aroma precursors, the premise of nicotine synthesis, polyphenols and other relevant material,having an important role in Nitrogen metabolism in tobacco plants and tobacco quality. We study the type and content of free amino acid changes in two kinds of Heilongjiang Burley tobacco BF08 and C2F with different processes.This study provides a more extensive basic data for further application of burley,having a positive significance for the adjustment of Burley processing parameters ,and has an advantage of the selection in excellent conditions.
The study use 0.1M HC
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