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谈制备波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂 　　波棱瓜子系葫芦科植物波棱瓜Herpetospermumcaudigerum Wall 的干燥成熟种子，为常用藏药。《中华人民共和国卫生部药品标准( 藏药标准) 》1995 年版记载，其味苦，性寒，能清腑热、胆热，具有清热解毒、去火降热、助消化的作用，用于治疗肝热、黄疸性传染型肝炎等症。本课题组前期研究表明，波棱瓜子抗肝炎的有效部位为总木脂素，主要由herpetrione、herpetin、herpetetrone、herpetotriol、herpetal 等成分组成。然而，由于木脂素类成分的水溶性较差，导致其口服生物利用度低，制约了抗肝炎的临床疗效。 　　纳米混悬剂( nanosuspensions，NS) 作为难溶性药物的新型给药系统，能显著改善难溶性药物的口服生物利用度，从而提高疗效。其中，高压均质技术作为纳米混悬剂制备的常用方法，具有工艺简单、重复性好、可实现产业化等优点。但是，当药物颗粒过大时，往往存在堵塞高压均质机限流缝隙的风险，同时其硬度过大时也不易形成纳米尺寸，而沉淀法联合高压均质能降低该技术的能耗和堵塞风险。 　　波棱瓜子总木脂素( total lignans from Herpetospermumcaudigerum，HTL) 中的大部分化合物都含有酚羟基结构，其溶解度受pH 影响。据此性质，本实验采用pH 依赖的溶解-沉淀法代替溶剂沉淀法联合高压均质技术，用于制备波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂，并利用Box-Behnken 设计-响应面法来优化处方，同时对其冻干粉进行理化性质表征和体外溶出行为考察。 　　1 仪器与材料 　　Nano DeBEE 超高压均质机( 美国必宜DeBEE公司) ; S-4800 扫描电镜( 日本日立公司) ; Winner801纳米激光粒度仪( 济南微纳颗粒仪器股份有限公司) ; D/Max 2500PC X 射线衍射仪( 日本Rigaku 公司) ; LGJ-18 冷冻干燥机( 北京四环科学仪器厂) ; RC-3 溶出度测试仪( 天津市新天光分析仪器技术有限公司) ; LC-20A 岛津液相色谱仪( 日本岛津公司) ; 85-2 恒温磁力搅拌器( 常州国华电器有限公司) 。波棱甲素对照品( 自制，纯度大于98%，批号121205) ; 波棱瓜子总木脂素原料药( 本实验室制备，以波棱甲素计，总木脂素的质量分数为82. 34%，波棱甲素的质量分数为18. 8%) ; 十二烷基硫酸钠( SDS) 、聚维酮K30 ( PVP K30) 、甘露醇( 北京凤礼精求商贸有限责任公司) 。乙腈为色谱纯( 德国Merck 公司) ; 其他试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2. 1 原料药中总木脂素的测定精密称取波棱甲素对照品10. 00 mg，置于25 mL 量瓶中，加甲醇超声溶解，并稀释至刻度线，即得到0. 4 mg /mL的对照品溶液。精密吸取上述对照品溶液80、100、150、200、250、300 mu;L，分别置于10 mL 量瓶中，加入10%变色酸水溶液1 mL 和浓硫酸6 mL，蒸馏水定容，沸水浴中放置30 min 后取出，用流水冷却，以相应的试剂为空白对照。按照紫外-可见分光光度法( 《中国药典》2010 年版一部附录VA) ，在570 nm 波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标( A) 、质量浓度( mg /mL) 为横坐标( C) ，绘制标准曲线，得回归方程A = 0. 044 3C - 0. 015 9，r = 0. 999 3，表明在3. 2 ～12. 0 mu;g /mL 范围内线性关系良好。精密称取原料药细粉5. 0 mg，置于10 mL 量瓶中，加甲醇超声溶解，并稀释至刻度线，再精密吸取1 mL，置于50 mL 量瓶中，加入10% 变色酸水溶液5 mL 和浓硫酸30 mL，蒸馏水定容，沸水浴中放置30 min 后取出，用流水冷却，以相应的试剂为空白对照。然后，测定吸光度值，根据标准曲线计算溶液中波棱甲素的含有量，结果测得原料药中总木脂素的质量分数( 以波棱甲素计) 为82. 34%。2. 2 波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂的制备取原料药10 ～ 20 mg，溶于0. 1 mol /L NaOH 溶液( 5mL) 和乙醇( 5 mL) 的混合溶剂中，超声溶解，然后将上述溶液在800 r /min 磁力搅拌条件下，缓慢注入到含SDS ( 2 ～ 4 mg) 和PVP K30 ( 2 ～ 4mg) 的水溶液( 90 mL) 与0. 1 mol /L HCl 溶液( 5 mL) 的混合溶液中。接着，将上述混悬液转入高压均质机，1 000 bar 压力下循环10 次，即得。 　　2. 3 Box-Behnke