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遗传学基础实验报告二
果蝇唾液腺染色体的观察
2009012337 生92 盛心磊
实验日期:2011年3月17日
一、 实验目的
1学习解剖镜、显微镜和显微摄像的正确操作方法和相关注意事项,同时训练染色制作压片的技术。
2完成对果蝇唾液腺染色体标本的制作和观察。
二、 实验原理(略)
三、 实验材料及仪器
1实验材料:果蝇的三龄幼虫
2实验仪器:显微镜(Nikon,YS-100型)、双筒解剖镜、解剖针、镊子、生理盐水、载玻片、盖玻片、改良苯酚品红染液、擦镜纸、吸水纸,小毛刷。
四、 实验方法及步骤
1调试双瞳解剖镜:用记号笔在一张纸上写字,放在解剖镜在舞台上,用粗准焦螺旋调节镜筒位置使自己能够到字迹,然后用细准焦螺旋调节直至看清。
2培养和挑取果蝇:用事先培养好的果蝇,用小毛刷从瓶中选取生长状况良好,个体较为肥大(呈黄白色,而非橙色)的三龄幼虫置于载玻片上。
3取出唾液腺、去除脂肪体:在载玻片幼虫处滴加一滴生理盐水(自来水可代替),放在解剖镜下观察。左手用解剖针压住虫体1/3处,右手用解剖针按住头部,轻轻拉动,使头部分离。取出囊状半透明的唾液腺,去除粘连的白色的脂肪体。把唾液腺外其余部分用吸水纸吸走。
4染色、压片:用吸水纸吸去载玻片上多余的水,滴加两滴改良苯酚品红染液,染色约20分钟。盖上盖玻片,在盖玻片上垫3层吸水纸,用一只手稳住载玻片和盖玻片以防止滑动,另一只手用一解剖针的针柄敲击盖片,使精细小管分布均匀。
5镜检:用4倍物镜找到大量细胞,换用40倍仔细观察。
6显微摄像:找到目标
7收拾整理仪器和材料。
五、 实验现象及分析
显微摄像结果如下图(由于仪器设置问题,六号机的标尺在拍摄的时候无法显示。)
图1(六号机) 果蝇唾液腺染色体(10*100=1000倍,图中标记部分为染色中心)
从图1,我们可以看到,染色体被压得较为分散,能够清楚地看到联会现象。此外能够清晰观察到染色体带纹。染色体并没有出现断裂的情况,但是有些部分染色不够清晰。
图2(6号机) 果蝇唾液腺染色体(10*100=1000倍,图中标记部分为染色中心)
图2的染色效果比图1要好。染色体基本分散开,能够清楚地辨认出正在联会的染色体。仔细观察,能够分辨出两对处于联会状态的染色体。此外,能够看到染色较深的区域——染色中心,该部分无法分辨出染色条带。
图3(6号机) 果蝇唾液腺染色体(10*100=1000倍,图中标记部分为染色中心)
图3相较于图1和图2,染色条带更加清晰,染色效果更好。
六、 作业题
1.减数分裂过程,染色体数目减半发生在哪个时期?
答:该过程发生在第一次减数分裂的末期和第二次减数分裂末期。
在减数第一次分裂的末期,同源染色体会分开,进入两个子细胞中;在减数第二次分裂,后期姐妹染色单体分开,染色体数目加倍,在末期姐妹染色单体进入不同的子细胞,故染色体数目也减半。
2.什么是染色中心?
答:染色中心是指染色体的着丝粒聚集在一起而形成的异染色质区域。染色中心通常指分裂间期核内染色较深的区域。由于聚集较密,染色较深故无法分辨出染色条带。
3.联会应出现在什么类型的细胞中
答:联会一般出现在有性生殖细胞中。一般在第一次减数分裂中期进行,但也会有极少数体细胞进行有丝分裂。
4.根据实验观察可以确定果蝇的染色体数目吗?
答:由实验观测结果,可以分辨出2-3条染色体的形态,但是考虑到重叠和观察的精确性,应该有大于等于三条染色体。
5.利用巨大染色体可以进行哪些遗传学研究?
答:在一定条件下,染色体上的带纹分布是一定的,因此可以用来观察染色体的形态结构变化,揭示特定的基因和具体带纹的关系,通过染色条带的变化来研究基因的行为。
七、参考资料
1张贵友等,《普通遗传学实验指导》,清华大学出版社,2003
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