接力反硝化机制研究-Word文档.doc

“接力反硝化”机制研究 学生 梅丽娟 学号：01145 导师：殷士学 教授 扬州大学农学院土壤微生物教研室 扬州大学荷花池校区 80232# 225009 土壤氮素循环始终是一个具有挑战性的课题。它涉及土壤氮素保存、氮污染治理、温室气体排放、全球氮素平衡等诸多方面。充分理解氮素循环机理是建立健康的、可持续的人类生存环境的前提。农业生产中较高的氮素投入以及含氮废水和含氮有机物的排放给环境带来了日趋增加的压力。因此，人们需要掌握精致而有效的氮素管理技术，而这些技术的形成又必需建立在人们对氮素循环机理的充分理解之上。这就说明了氮素循环机理的研究具有重大作用。氮素转化过程主要由微生物参与，涉及的微生物种群及其生理特征多样复杂。本文就氮素循环过程中的接力反硝化机制进行研究，评价“接力反硝化”和“反硝化菌反硝化”机制对土壤反硝化的贡献。 1 立论依据 按照微生物学定义，凡具备NO3- NO2- NO N2O N2 全套完整酶系统、在厌氧条件下能将NO3-依序还原到N2的呼吸性细菌称为反硝化细菌（denitrifiers），不具备这一特点但又能异化还原硝态氮或氮氧化物的细菌统称为硝酸还原细菌（nitrate reducers）,相应的过程分别称为反硝化过程和硝酸还原过程。 前人在测定反硝化细菌和硝酸还原细菌的数量时，发现反硝化菌数仅仅占硝酸还原菌数量的4.6%~37.1%；在研究土壤中硝酸异化还原成铵问题时仍然得到类似趋势。反复出现的现象极有可能预示着某种客观规律的存在，可是现有的土壤微生物学知识却不能解释这一现象。 分离条件简述 硝酸还原 其中反硝 反硝化菌/硝酸 资料 化菌个数 菌个数 还原菌（%） 来源 Nitrate broth/nitrate agar,厌氧 1500 146 9.7 Gramble 培养；世界不同地方23个土壤 Tryptic soy broth/ntrient agar, 214 46 21 Smith 等 厌氧培养；3个土壤 Synthetic glucose-nitrate agar, 34 10 29 Fazzolari等 厌氧培养；1个土壤 Nitrate broth/nitrate agar,厌氧 258~281 65~11 4~25 Chenepy等 培养；2个土壤 Nitrate broth/nitrate agar,厌氧培 97~89 6~34 6~38 殷士学等 养；Griffith和扬州土壤 硝酸肉膏蛋白胨培养基，厌氧 硝酸还原菌是反硝化菌数量的1.5~1287倍 Garcia 培养；12个土壤 表一 土壤中分离到的硝酸还原菌与反硝化细菌数量比较 上述趋势与现有土壤微生物学知识的矛盾在于：一般认为，土壤中的某一微生物学过程（例如硝态氮还原过程）是由具备该功能的微生物中数量最多的那些主导种群（如硝酸还原菌）所决定的；既然反硝化菌不是主导区系，那么土壤中的反硝化过程就理当不占主导地位；但是，事实恰好相反，几乎所有土壤（包括沉积物），只要满足反硝化条件（厌氧、有NO3-N和碳源存在），反硝化过程总是占主导地位（约站硝酸还原量的90%以上）。最容易想到的一种解释是：反硝化菌的活性可能远远高于硝酸还原菌活性。这样，即使反硝化菌数量很少，但因其活性高，照样可以表现出优势种群的功能。然而这种可能已被事实所否定。实际测定结果是，反硝化菌的活性在18.6~253μmol N2O/min/g of protein 范围内(Mahne and Tiedje,1995)，而硝酸异化还原成铵细菌(硝酸还原菌中的一类)的活性为193.4μmol NO3-/min/g of protein (Yin et al.，2000)两类菌的活性属于同一个数量级。显然，需要提出另一种解释。 根据这一问题，我们提出另一种反硝化机制：土壤中存在着不同类型的硝酸还原菌，尽管本身都不是反硝化菌，但彼此之间相互协作，此菌的还原产物被彼菌用作底物，最终将NO3-还原成N2，