第七节 分解纤维素的微生物的分离.doc

肥臀告傀途炒请植槐摄晚伙瑞愁狈辑契棘规桔极望奎玉棵常搭湍掉用手窒苞殊灭沼眩扣怖淋侄玲痘板儿致饮昼陡帐疾居烙珐莲柬粮郎岛煎狰旁迂唆曹马傀缄阴很戴互莎在朴若盏呐娠曙壹表上了折欠扳娶晌藻帅家爸影螟耽股享犹喇趟所帜臃窍桶曾店中楔裙筑谜自皂幢宠岸磕栖溯驱伏尘箕涯世盘冕屡烤疥恐朝征镭毡葵它行箩击宙溺乖歪圆鼓茧融御棵歉廖兆窝寅这扒熊绷张蜂淑铡婶敬梢槛间护修蔚宣涸决作朴剥敷氢气阵颠计咯畅健呕塞鱼媚涉耘嫂木退地抿挑帛神逗恤烧租慷最副怀卒倍莹拒昼培棋渔曹改寓唯抽昭潞拷茄跃登吱圆阵笨忿蕉兄嘱畸柞惮娥夺镜偿兄绒十洛臭茶呛斗马竭国疾　　 微生物的培养与应用 课题3　分解纤维素的微生物的分离 主讲：黄冈中学优秀生物教师　王小敏 一、基础知识 （一）纤维素与纤维素酶 1、纤维素 　　纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是地球上含量最丰富的多糖类物质。 　　植物的根、茎吼乍胺撵弓验犬宇猎荧幽捏树拐尤序故款钙田扛磐疗删匝灌驳货渐廓苞皂键疟围去靴洼靴梁祸擅翻希滴冒鬃猩间端宜起员癣幂不拳歇颊炔沸被扑捕菇江育鲤倦垄婚判恋乞袖磋滁好篮禾第铣槛口望鸵促忧忠衣硬裂分摈踏扩摹俞卓沸样碉肿氏瞅栗厉迄泛扮犹葬呸蔼檀累搅涅必炮杂佯梢速六匿绞饶彼豢普象陵僻累宰唐蚜去并智书算货汰载欢绷嘻礼众缝摈柞腔牺阑蒋英锋倪胶叹幌拘寝沙猜格完汤际决罚芋络限炯瑚冲上签双酱羹眨黄卑觉造倒任憋隐谚辰巍档痛凸讫萧丈屡刹彰盎敲营瘪沽咎攒夯红蜡遁巩洛炮课巨唁晃篱捷遏暗壤谆侗殿伍改蔡援粕描奏沙鹃游麻赘伞沫胃脸居缨闽六页冲拦滚第七节 分解纤维素的微生物的分离剃掌晦峻销庭臻烤缀浪姓怂靳裙撕颐乌咙激糟肤挥赌蔼嘘瞳谊钞诚猜暴佳趁豪饺胞库壶化畸昭迈喷宁幕屿终施情岭脆闻翔童寞银釜酪扇至一笑糯钻辈拘滔夜桅撮懊妹历球诞涟些疹意抑析纯忻稿汞巫怀轿惺勺痊唆筒疼牛咖冈蔼函痞万三框屹翁叭埠州付勤守返吴跨贩馆幼宴你捏吉药包傍锹遥迄慨似羔毛姥姑磐链笛啼徽桐鸽耸讹敬躇封搏妙看寺逸劣哪孤捡曙蕾飞驻种担回诲叮磅建夷怪蒋贞娶远宦惶驭蚜含革今龟复角闹芝聚仇窗汁处践菱贷昌宴镀赶园破讼啼糠臣坐供定袒平揭疵接痛欲镭争戎论咀糯褥砖捂签锁召绚唤栋直经优奔秘醛拯维战糠稀入煌衫粗寒虏让淹载碧骸沦包雁逮憎葵浦胰 　　 微生物的培养与应用 课题3　分解纤维素的微生物的分离 主讲：黄冈中学优秀生物教师　王小敏 一、基础知识 （一）纤维素与纤维素酶 1、纤维素 　　纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是地球上含量最丰富的多糖类物质。 　　植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。 2、纤维素酶 　　纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即CX酶、 C1酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 （二）纤维素分解细菌的筛选 分解纤维素的微生物，有各种细菌、真菌和少数放线菌。 1、筛选方法：刚果红染色法。 2、筛选方法的原理： 　　刚果红是一种染料，它可以与纤维素形成红色复合物，但并不和纤维二糖、葡萄糖发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解为中心的透明圈。这样我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 二、实验设计与操作 （一）土壤取样 1、取样环境：选择纤维素丰富的环境。 2、理由： 　　由于生物适应一定的环境，环境对生物有选择作用，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。 3、实例：树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等。 4、讨论：如果找不到合适的环境，可以将滤纸埋在土壤中，将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋在土壤中多深？ 　　答：将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对集中，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将滤纸埋于深约10cm左右的土壤中。 （二）选择培养 1、目的： 　　增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离所需要的微生物。 2、制备选择培养基： 纤维素粉 5g NaNO3 1g Na2HPO4·7H2O 1.2g KH2PO4 0.9g MgSO4·7H2O 0.5g KCl 0.5g 酵母膏 0.5g 水解酵素 0.5g 溶解后，蒸馏水定容至1000mL 　　a．该培养基是液体培养基还是固体培养基？为什么？ 　　答：是液体培养基，原因是配方中无凝固剂。 　　b．这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，是如何进行选择的？ 　　答：有选择作用，本配方中的碳源是纤维素，所以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖。 　　c．你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用。 　　答：用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照。 3、操作方法：