王镜岩生化第三版考研课件DNA的生物合成.pptVIP

DNA复制终止 真核生物有多种DNA聚合酶真核生物有多种DNA聚合酶。从哺乳动物细胞中分出5种DNA聚合酶，分别以a、β、γ、δ、ε来命名。真核生物DNA聚合酶和细菌DNA聚合酶的基本性质相同，均以4种脱氧核糖核苷三磷酸为底物，需Mg激活，聚合时必须有模板和引物 3－OH存在，链的延伸方向为 5’一3’。 端粒酶是一种含有RNA链的逆转录酶，它以所含RNA为模板来合成DNA端粒结构。通常端粒酶含有约150个碱基的RNA链，其中含二个半拷贝的端粒重复单位的模板。复制使端粒5’末端缩短，而端粒酶（telomerase）可外加重复单位到5末端上，结果维持端粒一定长度。 二、DNA的损伤修复 （一）错配修复 （二）直接修复 （三）切除修复 （四）重组修复 （五）应急反应（SOS）和易错修复 （一）错配修复 错配修复（mismatch repire）。DNA在复制过程中发生错配，如果新合成链被校正，基因编码信息可得到恢复；但是如果模板链被校正，突变就被固定。细胞错配修复系统能够区分“旧”链和“新”链。Dam甲基化酶可使旧链DNA的GATC序列中腺瞟吟N6位甲基化。复制后DNA在短期内（数分钟）为半甲基化的GATC序列，一旦发现错配碱基，即将未甲基化的链切除，并以用基化的链为模板进行修复合成。 （二）直接修复 紫外线照射可以使DNA分子中同一条链两相邻胸腺嘧啶碱基之间形成二聚体（TT）。这种二聚体是由两个胸腺嘧啶碱基以共价键联结成环丁烷的结构而形成的。影响了DNA的双螺旋结构，使其复制和转录功能均受到阻碍。光复活作用是一种高度专一的直接修复方式。它只作用于紫外线引起的DNA TT二聚体。光复活酶在生物界分布很广，从低等单细胞生物一直到鸟类都有，这种修复方式在植物中特别重要。而高等的哺乳类却没有。有其他修复机制所代替。 解聚合 切除修复机理 有四步：1、识别、特异性内切酶切开；2、以另一链为模板合成3、切去损伤链；4、连接酶连接缺口。 在重组修复过程中， DNA链的损伤部位可能被切除，也可能未被切除。当进行第二论复制时，如果损伤还留在母链上，仍会给复制带来困难，复制经过损伤部位时所产生的缺口还需通过同样的重组过程来弥补，直至损伤被切除修复所消除。但是，随着复制的不断进行，若干代后，即使损伤始终未从亲代链中除去，而在后代细胞群中也已被稀释，实际上消除了损伤的影响。 三、DNA的突变 （一）突变的类型 （二）诱变剂的作用 （三）诱变剂和致癌剂的检测 （三）诱变剂和致癌剂的检测 提要 第15章 DNA的生物合成 信息流动 不含DAN的生物，RNA也可自我复制。有些病毒以自己的RNA为模板指导DNA的生物合成称为逆转录。 一、DNA的复制 二、DNA的损伤修复 三、DNA的突变 提要 不要盲目相信权威，哪怕他是诺贝尔奖得主，要有自己的自由思维。--------- 教书感悟 DNA半保留复制 3、 结果与分析： E.ColiDNA复制起始点和终止点的位置。 真核生物中真核生物染色体DNA是线性双链分子，含有许多复制起点，因此是多复制子（multireplicon） 实验结果与预测结果的双向复制吻合。因此，DNA复制多数是以双向进行的。 试验结果 预测结果 DNA不同复制方式 双向对称复制： 大多数生物染色体 DNA的复制是双向的，并且是对称的。 1）DNA聚合酶（DNApolymarase）的反应， 再有DNA为模板的情况下，体系中有Mg+存在，加入四种脱氧核苷三磷酸，在DNA聚合酶的催化下聚合到DNA模板分子的末端。 2）DNA聚合酶催化的产物实在模板DNA的指导下进行的。 与4种脱氧核苷三磷酸的浓度、比例激酶的性质无关，而与模板的性质有关。 加入少量小牛胸腺DNA，聚合的结果产物是小牛胸腺DNA。加入噬菌体T4的DNA，合成的产物是噬菌体T4DNA；加入人工合成的一段PolyAT为模板，产物是ATAT的共聚物。 5‘－－3’方向 按照模板碱基配对的原则5‘－三磷酸末端与引物3‘端形成酯键。 DNA聚合酶 Ⅰ是一个多功能的酶分子。它可以催化以下的反应： ①通过核苷酸聚合反应，使 DNA链 5’一3’方向延长(DNA聚合酶活性）； ②由3’端水解DNA链（3’一5’核酸外切酶活性）； ③由5’端水解DNA链（5’一3’核酸外切酶活性）； ④由3’端使DNA链发生焦磷酸解； 最初认为酶的外切活性是由其它酶的污染引起，经过严格纯化，仍有这一活性，经进一步研究是酶分子固有的特性。 将DNA聚合酶用蛋白酶水解，得到两个片段。 大的一段6800