无菌保证基本原理与实际应用.pptVIP

疯牛病毒是耐热的（transmitting animal spongiform encephalopathy agents=TSE） * 图为人体致病菌分布，自然界有相似性 * 参考图：见DH BOOK 灭菌法。 * 100℃灭菌时，标准灭菌时间Fo达8时，需1000分钟，即近17个小时，产品会受到破坏。以上Z取10. * AutoCAD图 * 耐热孢子数（污染水平及耐热性） * 这一要求比过去具体，要求也更苛刻。原件D中是100℃下加热60分钟，而现国内流通蒸汽灭菌一般只有100℃下加热30分钟，因此，将它修改为10分钟。 * 跑步机上：1800米=142卡，540卡相当于跑步6.8公里。 * 细胞的形态在变，灭菌率当然也变化，故干热灭菌有较多的不稳定因素。 * 同一FH用于不同干热灭菌及去热原，很容易引起误解。 * 密封依靠压缩空气吹垫圈，压缩空气皮管老化，进了灭菌柜，蒸汽进不去，内压达1.5公斤时，温度只有116。此灭菌柜和原料脉动蒸汽灭菌柜是否同一供货商？ * 本图为示意，冷却水进出管现实际在右侧。 * AutoCAD图 * 这种耐热参数低的生物指示剂是美国药典上没有收载的，估计有生产单位，这对热稳定性差的产品来说，在低Fo条件下判定合格与否提供了实验依据。 * 工程设计、建设与日常管理 灭菌前工艺设备与运行应关注－微生物污染控制方面的风险 主要风险因素： 工艺设备设计与清洁、消毒方法 包装容器清洗设备设计与方法 洁净区及HVAC系统和操作人员行为 残留微生物在适宜的条件下繁殖 关键设备故障 -*- 微生物污染的风险控制（一） 风险管理措施（监控） 制定灭菌前微生物含量警戒、纠偏、合格标准 取样方法SOP：保证灭菌前微生物含量样品的代表性 样品应反映最差情况 年度质量回顾可反映整体状况 -*- 微生物污染的风险控制（二） 管理措施（设备与容器的清洁与消毒） 设备的状态管理－防止状态的混淆 经验证的清洁和消毒方法 清洁和消毒工艺关键参数：水温，清洁剂浓度，流速，时间，阀门的开闭，蒸汽温度，压力等 SOP应详细规定清洁和消毒的周期与有效期 包装材料清洗设备的功能和运行状况 -*- 微生物污染的风险控制（三） 管理措施（消除生产环境和人员造成的污染） HVAC系统设计应以生产工艺动态条件为基础 动态监控洁净区的环境 定期高效过滤器泄漏率测试 SOP规定发生诸如停电、通风系统故障、环境卫生状况超标等偏差后应采取的相应措施 洁净区清洁和人员行为规程 -*- 微生物污染的风险控制（四） 管理措施（工艺和关键设备偏差） 控制各工艺步骤的时限 关键设备故障后的处理方法 发生偏差后增补灭菌前微生物含量样品 -*- 灭菌设备与运行 灭菌工艺对无菌保证有决定性的影响 特别关注灭菌设备的工艺适用性 灭菌设备和灭菌工艺的验证 灭菌设备的状态和维护 灭菌工序现场的管理 -*- -*- 湿热灭菌 湿热灭菌通常指一定压力下的蒸汽灭菌，也包括过热水灭菌（水浴式或喷淋式） 实际上只要微生物处于达到水－水蒸气平衡状态下的灭菌过程，都是湿热灭菌 例：实验室给微生物取样瓶灭菌时通常加入1ml水并密封。 -*- 干热灭菌 干热灭菌与湿热灭菌的动力学特征相似，符合“ 对数规则” ，但灭菌的机理却并不相同。 干热灭菌为何需较高的温度？ 水份的影响：湿度低 机理不同：干热灭菌是使微生物氧化而不是使蛋白质变性 -*- 干热灭菌 干热灭菌的介质通常是热空气 用对数规则描述微生物杀灭过程，准确性较差 温度高，200 ℃以上 用于玻璃容器、手术器械等 无菌生产工艺中安瓿、西林瓶的灭菌和去热源 -*- 干热灭菌与去热原的关系 去热原的工艺条件比孢子杀灭程序要苛刻得多，通常相当于标准干热灭菌时间FH 的数十倍。 如果干热法去热原工艺能使细菌内毒素下降3个对数单位，就不必再进行微生物的生物指示剂挑战性试验。 -*- 灭菌设备 混合蒸汽灭菌柜 下排式蒸汽灭菌柜 脉动真空蒸汽灭菌柜 喷淋式灭菌柜 水浴式灭菌柜 隧道式洗瓶灭菌柜工作原理 灭菌设备核心关注点 足够的热均匀性 防止二次污染的设计 设备工作稳定可靠 -*- -*- 混合蒸汽灭菌柜 混合汽体灭菌柜 顶上用一风扇，使灭菌均匀 无风扇时，灭菌容易不均匀 -*- 下排式蒸汽灭菌柜 热蒸汽在上 冷空气在下 蒸汽挤空气 -*- 脉动真空蒸汽灭菌柜 残存的空气越少，温度和压力的线性关系越好 密封圈 -*- 旋转喷淋灭菌柜 纯化水或注射用水作传热介质-过热水灭菌 加热时开工业蒸汽 冷却时，可用冷冻水或自来水冷却 产品转动，受热均匀 软袋灭菌时，用过热水较多，但需加压缩空气 -*- 干热灭菌柜 常见程序：180×2小时，细菌内毒素下降3对数单位 -*- 隧道式洗瓶灭菌柜工作原理图 瓶清洁 排水汽 预热 去热原 冷却 干热灭菌