第7章细菌的遗传分析.pptVIP

利用转化作图 观察两个基因同时转化的频率，判断两者是否连锁； 确定连锁关系后，通过转化后外源片段与受体基因发生重组来确定遗传距离。 * * 1. 普遍性转导与作图 噬菌体所携带的供体(细菌)染色体片段是完全随机的，即供体基因组中所有基因具有同等机会被转导形成部分二倍体，经交换和重组后，形成转导频率大致相等的不同转导子，这种转导称为普遍性转导(general transduction) 转导 局限性转导 普遍性转导 * 共转导或并发转导(cotransduction)：指两个基因同时转导的现象 双因子转导(two-factor transduction)实验：就是每次观察两个基因的转导，通过每两个基因的共转导频率确定这些基因在染色体上的顺序 如果两个基因共转导的频率愈高，表明两个基因连锁愈紧密，相反共转导频率愈低，则表明两个基因距离愈远 * 例如，用大肠杆菌的P1噬菌体进行下列转导实验，测定thr+1eu+aziS的连锁关系 三因子转导：只做一次实验就可以推出3个基因的次序 * P1噬菌体 E coli (thr+1eu+azir) E coli (thr-1eu-azis) thr leu azi leu azi thr 基本培养基 不含leu 100%leu+,50%azir, 2% thr+ 不含thr 100%thr+,3%leu+,0%azir 哪个图正确？ * 以大肠杆菌trpA+supC+pyrF+细胞作为供体，trpA-supC-pyrF-作受体，由P1噬菌体作为载体进行转导。首先选择supC+,然后检测supC+转导过程中其他两个基因被转导的情况，结果如下： supC+ trpA+ pyrF+ 36 supC+ trpA+ pyrF- 114 supC+ trpA- pyrF+ 0 supC+ trpA- pyrF- 453 603 3个基因的次序为supC trpA pyrF 最难转导，中间发生交换的结果 * 共转导频率： supC+trpA+＝(36＋114)/603=0.25 supC+pyrF+＝36/603=0.06 supC+ trpA+ pyrF+ supC－ trpA－ pyrF－ supC+ trpA+ pyrF+ supC－ trpA－ pyrF－ supC+ trpA+ pyrF+ supC－ trpA－ pyrF－ supC+ trpA+ pyrF+ supC－ trpA－ pyrF－ supC+ trpA+ pyrF+ 36 supC+ trpA+ pyrF－ 114 supC+ trpA－ pyrF+ 0 supC+ trpA－ pyrF－ 453 d=L(1-x1/3) 两个基因紧密连锁的物理距离为： d: 同一染色体两个基因之间的图距 L: 转导DNA的平均长度 x: 两个基因之间的共转导频率 * * 2. 局限性转导与作图 这类噬菌体只能转导供体基因组中的特定基因 如温和噬菌体?作为一种附加体，既可以自主状态存在，也可以整合到细菌基因组(特定位置attB处)，形成原噬菌体 The insertion of ? phage * The excision of ? phage * * 局限性转导：这种转导仅限于靠近原噬菌体附近的基因，即?噬菌体能专门转导大肠杆菌的gal或bio基因。 转导子（transductant）：通过转导将外源基因整合到自身基因组的受体细胞。 * 接合（conjugation）：两种细菌通过F因子转移DNA的过程。 性导（sexduction）：通过F′因子将供体细菌的基因导入受体菌的过程。 转化（transformation）：外源DNA分子直接进入受体细胞的过程。 转导（transduction）：通过噬菌体将DNA转入宿主细胞并产生新性状的过程。 转染（transfection）：外源基因通过病毒进入真核细胞而实现遗传转化。 接合？转化？转导？性导？ * * 总 结： 细菌是有性别的: F因子(F+/Hfr/F’)；供体和受体，单方向传递遗传物质；中断杂交和重组作图(Hfr)；性导(F’) 细菌重组的特点：偶数双交换；环状整合 转化(外源DNA进入细菌细胞)；转导(利用噬菌体转导细菌DNA的过程) * * 几个 Hfr 菌株的基因顺序 菌株 转 移 顺 序 Hfr H O thr azi lac tsx gal trp mal xyl metB thi F C O tsx lac azi thr thi metB