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第五章微生物的营养
第五章 微生物的营养 本章主要内容 微生物的六大营养要素 微生物吸收营养物质的方式 微生物的营养类型 培养基配制的原则 培养基的类型 一、微生物细胞的化学组成 实验室中常用无机盐 NaCl、MgSO4、K2HPO4、KH2PO4、CaCl2、FeCl2、ZnCl2、CoCl2等 单纯扩散(simple diffusion) 促进扩散(facilitated diffusion) 主动运输(active transport) 基团转位(group translocation) 四种运输营养物质方式的比较 综上,根据微生物所需碳源、能源不同可将 微生物化为四类: 光能无机营养型:光能自养型 光能有机营养型:光能异养型 化能无机营养型:化能自养型 化能有机营养型:化能异养型 为免受杂菌污染,培养基必须严格灭菌。一般使用高压蒸汽灭菌,101.3kPa,121.3℃,15~30min。 一些不耐热的培养基,如含糖培养基可采用56kPa,115℃,15~30min或采用过滤除菌。 在一些用于研究的定量合成培养基中,为防止金属离子沉淀,可将金属离子(Ca、Mg、Fe等)与磷酸盐、碳酸盐分别灭菌再混合或加入螯合剂乙二胺四乙酸。 灭菌后培养基pH会发生改变,一般使pH降低,可根据所培养的微生物的要求,在灭菌前后加以调整。 1、按微生物种类分 细菌培养基:牛肉膏蛋白胨培养基等 放细菌培养基:高氏一号培养基等 酵母菌培养基:麦芽汁培养基等 霉菌培养基:查氏培养基等 2、按培养基的成分划分 天然培养基 合成培养基 半合成培养基 (3)半合成培养基(semi-synthetic medium) (2)半固体培养基(semi-solid medium) 考研试题 EMB培养基含有哪几种主要成分?在检查大肠菌群时,各起什么作用? 配方:(g/L) 蛋白胨 10.0 乳糖 10.0 磷酸氢二钾 2.0 琼脂 15.0 伊红 0.4 美蓝0.065 pH值7.1 ± 0.2 25℃ 原理: 蛋白胨提供碳源和氮源;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;磷酸氢二钾是缓冲剂;琼脂是培养基凝固剂;伊红和美蓝是抑菌剂和pH指示剂,可抑制革兰氏阳性菌,在酸性条件下产生沉淀,形成紫黑色菌落或具黑色中心的外围无色透明的菌落。 酪素培养基(分离蛋白酶生产菌):酪素l0g,葡萄糖2.0g,KH2PO40.19,琼脂20g,蒸馏水1000ml,pH6.5~7.0,115℃灭菌20min。 我们有目的地控制培养基的组成成分或物理化学条件,以达到有利于某些微生物生长繁殖而抑制其它微生物生长繁殖的目的,而配制的培养基。 ①依据某些微生物的特殊营养要求设计:如分离纤维素分解菌而配制的以纤维素为唯一碳源的培养基。 ②在培养基中加入某种化学物质,对要分离的微生物无害,但可抑制或杀死其它微生物。 例:含抗生素的培养基。 (4)选择培养基(selective medium): 分为两种: 纤维素分解菌初筛分离平板培养基 KH2PO4 2.0g, (NH4)2SO4 1.4g, MgSO4·7H2O 0.3g, CaCl2 0.3g, FeSO4·7H2O 0.005g,MnSO4 0.0016g, ZnCl2 0.0017g, CoCl2 0.002g, 蛋白胨 2.0g, 蒸馏水1000mL, pH5.5~6.0, 121℃灭菌20min, 以滤纸为唯一碳源。 土壤中分离真菌的选择性培养基——马丁氏(Martin)培养基 K2HPO4 1g, MgSO4·7H2O 0.5g, 蛋白胨5g, 葡萄糖10g, 1/3000孟加拉红水溶液100mL, 水900mL, 自然pH, 121℃湿热灭菌30min, 待培养基融化后冷却55~60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。 ①种子培养基(seed culture medium)———是为保证发酵生产获得大量优质种子而设计的培养基,特点是营养较丰富,氮源比例较高。有时为使菌种能迅速适应后面的发酵条件,还有意识地加入发酵培养基的基质。 ②发酵培养基(fermentation medium)——用于生产预定发酵产物,一般以碳为主要元素,碳源含量往往高于种子培养基。大规模生产时,原料应价廉易得,还应有利于下游的分离提取。 5、 根据培养目的来分 掌握微生物五大营养素及其功能、微生物的营养类型、培养基的概念、配制原则及分类、微生物对营养物质的吸收方式。 总 结 思考题 1、微生物的六大营养要素有哪些?其各自的作用如何,都有哪些常用物
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