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第四章 微生物反应器操作 4.1 微生物反应器操作基础 微生物培养过程根据是否要求供氧,分为厌氧和好氧培养。前者主要采用不通氧的深层培养;后者可采用以下几种方法: (1)液体表面培养(如使用浅盘); (2)通风固态发酵; (3)通氧深层培养。 就操作方式而言,深层培养可分为: (1)分批式操作(batchoperation)[图4—l(a)]。 (2)反复分批式操作(repeated batchoperation)[图4—1(b)]。 (3)半分批式操作(semibatch operation)[图4—l(c)]。 (4)反复半分批式操作(repeated semibatchoperation)[图4—1(d)] (5)连续式操作(continuous operation)[图4—1(e)]。 分批式操作是指基质一次性加入反应器内,在适宜条件下将微生物菌种接入,反应完成后将全部反应物料取出的操作方式。目前,发酵制品的生产中多采用这种操作方式。操作过程中基质体积变化曲线如图4—1(a)所示。 反复分批式操作是指分批操作完成后,不全部取出反应物料,剩余部分重新加入一定量的基质,再按照分批式操作方式,反复进行。其培养过程中基质体积变化曲线如图4—1(b)所示。 半分批式操作又称流加操作,是指先将一定量基质加入反应器内,在适宜条件下将微生物菌种接入反应器中,反应开始,反应过程中将特定的限制性基质按照一定要求加入到反应器内,以控制限制性基质浓度保持一定,当反应终止时取出反应物料的操作方式[图4—l(c)1。酵母、淀粉酶、某些氨基酸和抗生素等采用这种方式进行生产。 反复半分批式操作是指流加操作完成后,不全部取出反应物料,剩余部分重新加入一定量的基质,再按照流加操作方式进行,反复进行。其培养过程中基质体积变化曲线如图4—1(d)所示。 连续式操作是指在分批式操作进行到一定阶段,一方面将基质连续不断地加入反应器内,另一方面又把反应物料连续不断的取出,使反应条件(如反应液体积等)不随时间变化的操作方式。活性污泥法处理废水、固定化微生物反应等多采用连续式操作。连续培养过程中基质体积变化曲线如图4—1(e)所示。 4.2分批式操作 分批式操作是发酵工业中广泛采用的方法之一,与连续式操作相比,分批式操作的特点(表4—1)是:微生物所处的环境是不断变化的;可进行少量多品种的发酵生产;发生杂菌污染能够很容易中止操作;当运转条件变化或转产新产品时,易改变处理对策;对原料组成要求较粗放等。下面首先介绍分批式培养时微生物的生长曲线。 4.2.1 生长曲线 随着培养的进行,基质浓度下降,菌体量增加,产物量相应增加。分批式培养过程中,微生物的生长可分为: ①迟缓期;②对数生长期;③减速期;④静止期;⑤衰退期。 迟缓期的长短依培养条件不同而异,且受种子种龄及其培养条件的影响。一般认为,细菌的迟缓期是其分裂繁殖前的准备时期。此时期内,细胞内某种活性物质未能达到细菌分裂所需的最低浓度,因此出现了对数期前的“静止期”。工业生产中选用对数期的种子接种,正是为了缩短迟缓期。 当准备工作结束,细胞便开始迅速繁殖,进入对数期。此时,菌体量随时间呈指数函数形式增长(故又称指数生长期)。此时,μ值一定,有 应指出的是,μ为定值是对给定条件而言的。当环境条件与培养条件组成发生变化时,μ值也将发生变化。生产中,应根据目的产物的不同,通过选择环境条件和培养基组成,以达到选择适宜的μ值,使生产高效率地进行。 经过减速期到达静止期的原因,一般认为是: ①必须的营养物质不足; ②氧的供应不足; ③抑制物的积累; ④生长因子不足; ⑤生物的生长空间不够等。 若假定直至静止期特定基质A的消耗速率d[s]A/dt与反应系统中活菌体量x成正比,则 进入衰退期后,由于细胞缺乏能量储藏物质,以及细胞内各种水解酶的作用,引起细胞自身的消化(autolysis),使细胞死亡。实际上,即使在生长旺盛的对数生长期,也有一部分微生物细胞死亡。因此,Monod方程应改写为: 4.2.2状态方程式 微生物培养过程是指基质在微生物的作用下转变为产物(或菌体)的过程。这一过程是由物质转换过程,即微生物的生物代谢活动,简称生物代谢过程和环境过程两个部分所组成。实际上,可以这样认为,前一个过程发生在细胞内部,后一过程则发生在细胞外部。 培养过程中,与生物代谢过程相关的主要参数有: 基质的比消耗速率γ、氧的比呼吸速率QO2、比生长速率u、产物的比生成速率π和CO2比生成速率QCO2等;与环境过程相关的
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