十一章 胚胎移植课件.pptVIP

第十一章 胚胎移植 胚胎移植技术概述 胚胎移植的意义 国内外发展概况 胚胎移植的基本原则 牛胚胎移植操作步骤 一、概述 （一）概念 胚胎移植是指将一头良种母畜配种后的早期胚胎取出（或通过体外受精及及其他方式得到体外生产的胚胎），移植到另一头同种且生理状态相同的母畜体内，使之继续发育成为新个体的过程。 也称作借腹怀胎。提供胚胎的个体为供体(Donor)，接受胚胎的个体为受体(Recipient)。 （二）发展概况 1890年 英国第一次兔获得胚胎移植成功 1934年 绵羊 1949年 山羊 1951年 猪、牛 1970年 马 1975年1月 美国丹佛召开第一届国际胚胎移植学会 1980年代 欧洲使用MOET 奶牛育种 (三)胚胎移植的意义 1.充分发挥优良母畜的繁殖潜力 2.缩短世代间隔，加快育种进程 3.简化良种引种方法 4.保存品种资源 5.诱发单胎动物产双胎 6.研究手段 动物繁殖生理学、生物化学、遗传学、细胞学、胚胎学、免疫学、动物育种和进化等学科 1.充分发挥优良母畜的繁殖潜力 以奶牛为例，按照目前的技术水平，供体母牛每隔60d可进行超排处理一次，每次能获得可用胚胎4-5枚，一头良种母牛每年能生产可用胚胎25-30枚，移植到受体内能获得12-15头犊牛，而在自然状态下，一头母牛平均每年只能获得一头犊牛。 （四）生理学基础、基本原则和条件 1、生理学基础 （1）母畜发情后生殖器官的孕向发育 （2）早期胚胎呈游离状态 （3）不存在免疫问题 （4）胚胎的遗传特性不受受体影响 2、胚胎移植的基本原则 （1）同一性原则（供、受体在分类上的相同属性；在生理上的一致性 ；在解剖位置上的一致性）。 （2）胚胎的期限 （3）胚胎的质量 （4）供、受体的状况 3、条件 供体超排反应良好； 胚胎回收顺利； 胚胎质量好、保存可靠； 受体黄体良好； 受体饲养管理条件良好； 技术人员操作熟练； 胚胎操作及移植器械恰当。 (五)胚胎移植的技术程序 包括供体的超数排卵、供体和受体的同期发情处理、供体的发情鉴定与配种、胚胎采集、胚胎的检查与鉴定、胚胎的保存、胚胎的移植 胚胎移植程序示意图 二、胚胎移植的基本步骤 (一)供体和受体的选择 1.供体的选择 遗传学价值高；身体健康（传染病、寄生虫病、生殖系统疾病）；年龄适中；体况适中；发情周期正常；避免应激 2.受体的选择 (二)供体和受体的同期发情 最好12h之内，如果超过±24h(牛)或±48h(绵羊和山羊)，妊娠率即急剧下降 1、仅对受体进行同期发情处理 2、供、受体同时进行同期发情处理 (三)供体的超数排卵 1.超排方法 （1）已知发情周期供体超排 （2）未知发情周期供体超排 （未知+安排工作+初期周期不稳定） 孕激素+FSH PG一次注射法 PG二次注射法 同（1） 3.影响超排效果的因素 (1)个体差异 与动物的种类、品种、年龄、胎次、体重及营养情况都有关系 (2)激素 所用激素的种类、用量和注射程序，都会对超排效果有一定的影响 (3)用药时间 发情周期、产后阶段及季节不同，超排结果均有差别（山羊一般可以在注射PGF2α后的48～96h内发情。可使超排处理安排在周期的第9～17d的任何一天。但15d以后处理排卵数较多）。 4.超排效果的评判标准 实践中一半以上的处理母畜得到满意结果，就认为是成功的。 牛较理想的要求是达到10～12个，可用胚率65%，可获6～7个；妊娠率60%，可获3～4头犊牛，在经济上比较合算。当前一般水平是每头供体牛平均提供4～5个好胚胎。 (四)供体的发情鉴定和配种 供体大多在超排处理后12～48h发情，一般在发情后8～12h输精一次，以后间隔8～12h再输精一次或自然交配。 (五)胚胎回收与鉴定 1.回收时间 2.回收方法 （离体生殖道、手术回收、非手术回收） 手术回收 场所、器械和人员的准备 供体准备 胚胎采集 3.检胚 检胚吸管 4.胚胎鉴定-检查和评定质量 (1)形态学法 ①卵子是否受精。 ②透明带形状、厚度，有无破损等。 ③卵裂球的大小、致密程度是否有差异，卵黄间隙是否有游离的细胞或细胞碎片。 ④胚胎发育阶段与回收时应达到的胚龄是否一致，胚胎的透明度，胚胎的可见结构(内细胞团、滋养层细胞、囊胚腔)是否清晰可见。 不同发育阶段的正常胚胎和不正常胚胎 (2)体外培养法 (3)荧光(活体染色)法 (4)代谢活性测定法将待鉴定胚胎放入含有葡萄糖的培养液中，培养1h