ELISA灰区处理SOP.doc

ELISA法检测灰区处理SOP 项 目 方 法 ELISA方法 编写人 甄茂全 日期 2012/10/01 审核人 陈寿林 日期 2012/10/01 批准人 吴向平 日期 2012/10/01 文件分发部门和/或个人 本规程自2012年月01日起实施，每2年复审一次 NBKNYY-JYK-MY-002 文件版本号 第1版 吴向平 检验科主任 陈寿林 实验室名称 项目 编号 制定日期 宁波市康宁医院检验科血清免疫室 乙肝两对半、HIV、TP、HSV、HCV NBKNYY-JYK-MY-002共1页 第1页 2012/10/1 [目的] 为了确保医疗安全，提高检验质量，保证检验结果准确无误，现制定ELISA灰区处理规定。 [该SOP变动程序] 本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。 [测定原理] ELISA测定的阳性判断值，通常是将大量阴性和阳性人群的测定数据进行统计分析后确定的，其确定依据为判断结果的假阳性和假阴性率最低。在阳性判断值周围一定范围内之外的测定结果可归为可疑，亦即ELISA测定的“灰区”。“灰区”的大小可用统计学方法确定。测定结果处于“灰区”的样本，可通过确认试验或追踪检测来确定到底是阳性还是阴性。[灰区设定] 根据科室实际情况，将科室开展项目的CUT-OFF值上下各浮动10%作为我科的灰区，具体见下表： NO. 项目名称 CUT-OFF值 1 乙肝表面抗原 ±2.1*NC*10% 2 乙肝表面抗体 ±2.1*NC10% 3 乙肝e抗原 ±2.1*NC10% 4 乙肝e抗体 ±0.5 * (PC+NC) 10% 5 乙肝核心抗体 ±0.5*NC10% 6 乙肝核心抗体-IgM ±4*NC10% 7 丙型肝炎抗体 ±2.8*NC10% 8 梅毒螺旋体抗体 ±2.8*NC10% 9 单纯疱疹病毒Ⅱ-IgM ±0.1+NC10% 10 人类免疫缺陷病毒抗体 ±0.12+NC 注：NC为阴性对照均值，PC为阳性对照均值。 [处理步骤] 若某一检测结果处于该检测项目的灰区，在电脑的检测界面上会以蓝色字体显示。 查看当天的室内质控是否在控。 若室内质控在控，回忆检测过程中试剂的选择准备标本内源性和外源性干扰因素前者包括类风湿因子、补体、异嗜性抗体、自身抗体、溶菌酶等，后者包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长、标本凝固不全、冷冻标本的反复冻融等温育洗涤显色比色采用同一种试剂复查，理由是市售试剂均通过国家食品药品监督管理局（SFDA）认可，严格按照其说明书操作，检测结果具有法律效应，若使用不同的试剂（非确证试验）复查，当结果不相符合时，则最终结果难以判断（免疫检测缺乏“金标准”）。[结果判断] 复查结果是是“阳性”或者“阴性”“阳性”或者“阴性”传统的ELISA结果只报告“阳性”或者“阴性”，但不能解决“灰区”的问题，因此引入“可疑”的报告方式是比较合理和科学的，同时对结果做必要的说明，如“结果已经复查，建议定期复查或定量检测”；对于HBeAb、HBcAb检测，由于各试剂盒CO值差异及变异系数大等因素，结果缺乏可比性，位于CO值附近的标本复查结果阴阳性只是概率事件，另外HBcAb存在原倍和1：30检测模式及定量检测模式，报告结果的不一致对于临床实验室来说是不可回避，也是目前医疗纠纷主要集中点和“结果互认”的最大障碍，因此在减小室内变异的同时必须引入阳性和弱阳性的报告方式。 [注意事项] 染菌、严重溶血或高血脂的待测样品可能引起错误结果，应重新采样。 临床医生应结合临床症状进行诊断，并对抗体水平进行动态观察。 确保样品稀释准确。 不同批号试剂不可混用。