外标一点法外标二点法.docVIP

外标一点法：二至丸的含量测定 将二至丸研细，取0.5030g，精密称定，置索氏提取器中，加乙酸乙酯适量，加热回流提取6小时，提取液回收乙酸乙酯至干，残渣用乙酸乙酯溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取齐墩果酸对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（2010年版药典一部附录Ⅵ B）试验 精密吸取供试品溶液2μl、对照品溶液1μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷—丙酮—乙酸乙酯（5：2：1）为展开剂，展开，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点清晰，放冷，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定（防止薄层板上有效成分被氧化变质而变颜色），照薄层色谱法（2010年版药典一部附录Ⅵ B薄层色谱扫描法）进行扫描，波长：λS=530nm，λR= 680nm，测量供试品吸光度积分值与对照品吸光度积分值分别为A样=880AU，A对=450AU，计算，即得。 本品每1g含女贞子以齐墩果酸（C30H48O3）计，不得少于8.0mg。 解：由C（m）=F1*A得 F1=m/A，则F1 == 那么m样= 上述过程中，对照品取量1ul，则m对=1ug，又A样=880AU，A对=450AU， 则 m样=880AU*1ug/450AU=1.96ug 由此知， m样=1.96ug/2ul, 则5ml样品中m1=1.96ug*5ml*103ul*10-3mg/2ul=4.89mg 样品中齐墩果酸含量为4.89mg/0.5030g=9.72mg/g8.0mg/g 所以，供试品中女贞子以齐墩果酸含量符合2010年版药典一部附录Ⅵ B规定 外标二点法：二妙丸的含量测定 取二妙丸适量，研细，取1.0527g，精密称定，置索氏提取器中，加乙醚适量，加热回流1～2小时，弃去乙醚液，残渣挥去乙醚，加甲醇适量，回流提取至提取液无色，将提取液（必要时适当浓缩）转移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含60μg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（2010年版药典一部附录Ⅵ B）试验，精密吸取供试品溶液1μl、对照品溶液1μl与3μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以苯—乙酸乙酯—异丙醇—甲醇—浓氨试液（12：6：3：3：1）为展开剂，置用氨蒸气与展开剂同时预平衡15分钟的展开缸内展开，取出，晾干，照薄层色谱法（2010年版药典一部附录Ⅵ B薄层色谱扫描法）进行荧光扫描，激发波长λ=365nm，测得供试品溶液平均峰面积值为150，对照品1溶液平均峰面积值为100，对照品2溶液平均峰面积值为450，计算，即得。 本品每1g含黄柏以盐酸小檗碱（C20H17NO4·HCl）计，不得少于3.0mg。 解：由C（m）=F1A+F2得 m1=F1A1+F2 m2=F1A2+F2 由此可推出：F1=,F2=(m1+m2) - F1(A1-A2) m1=60*10-3*10-3 =6*10-5g A1=100 m2=60*10-3*10-3*3 =18*10-5g A2=450 由此：F1=3.4*10-7 F2=2.65*10-5 则m=F1A+F2=7.75*10-5 则1.0527g,50ml供试品溶液中盐酸小檗碱含量为7.75*50*1000*10-5/1.0527=3.68mg/g3mg/g 所以，供试品中盐酸小檗碱含量符合2010年版药典一部附录Ⅵ B规定