实验操作基本技能讲解和种子萌发.ppt

细胞遗传学实验（染色体实验5次）经典遗传学(果蝇为材料 4次）基础分子遗传学实验（DNA提取 2次）数量形状遗传学实验（1次） 实验一 实验操作基本技能讲解和种子萌发 一 实验目的 1 了解实验室常规仪器使用和操作注意事项； 2 掌握常见植物种子萌发方法 ； 3 掌握种子有丝分裂根尖取材及处理过程。 1 CX21显微镜 (四) 实验报告格式 每次实验报告均要有封面; 报告纸A4纸； 实验目的 实验材料 实验简要步骤 实验结果 讨论分析 (五) 种子萌发和有丝分裂根尖准备 1 实验种子p 黄豆、蚕豆、红豆、绿豆 2 用具 培养皿，纱布，剪刀或刀片，冻存管 3 药品 秋水仙素， 冰醋酸、无水乙醇， 卡诺氏固定液（无水乙醇：冰醋酸＝3：1） (五) 种子萌发和有丝分裂根尖准备 4 种子萌发过程 1）挑选适量黄豆种子放在已铺好纱布的培养皿中，加适量蒸馏水浸泡种子(水浸没种子的2/3)； 2）培养皿浸泡种子约（48-）120小时，观察种子萌发情况； 3）每天更换水，切0.5-1cm根尖用0.1%秋水仙素处理4h以上，然后用卡诺氏固定液固定24h，固定时间4-24小时； 4）根尖用70%乙醇保存（冻存管）。 * * 遗传学实验 S201 S203 黎双飞 667017 sfli@szu.edu.cn 二 实验内容 （一） 实验室安全和注意事项； （二）熟悉显微镜、离心机和移液器的使用； （三）熟悉常用染料、缓冲液的配制； (四）实验报告格式 （五）种子萌发，处理根尖； 双目观察筒，镜筒倾角为30°，瞳间距48-75mm 显微镜的使用： 1. 将所需观察的标本放在载物台，上卡夹住。 2. 将标本移动到载物台中间，先用低倍物镜观察。 3. 将显微镜亮度调节钮调至最小，接通显微镜电源，打开显微镜电源开关。 4. 把亮度调节钮移至适当位置，转动粗调手轮将载物台，上升到能见到标本的影形，转动微调手轮即可得到清晰的物象。 5. 使用完毕转动粗调手轮将工作台下降到底，再将亮度调节钮移到最小亮度处。 6. 关闭电源开关。 注意事项： 1. 打开显微镜电源开关前一定要将亮度调节钮调至最小 2. 先用低倍物镜观察，再换高倍物镜，如果使用油镜观察，注意镜头的转动方向和使用后用清洁剂去除干净香柏油。 3. 转换物镜时，手握转换器，而不是物镜。 离心机： 操作程序： 把离心机放置于平面桌或平面台上，检查离心机是否放置平稳。 打开门盖，将离心管平衡后放入转子体内，离心管必须对称放入。 关上门盖，检查门盖是否关紧。 插上电源插座，按下电源开关。 设置转速和时间：时间为倒计时，转速为由低到高且不能超过规定转速。 当转子停转后，打开门盖取出离心管。 关断电源开关，离心机断电。 注意事项： 离心管必须平衡，且不能超过规定容量；如果是小体积的1.5 ml EP管，则必须是加入相同体积的液体； 离心管必须对称放入； 门盖一定要关紧； 设置转速时要由低到高。 电子电平使用注意事项 1 了解安装条件、安装步骤、电源条件; 2 熟悉具体使用 首先要清洁天平；接着平衡；然后称量；最后清洁、复原。 注意： 工作台水平干净；不能超出陈量范围；药品轻放、慢放；剧毒或腐蚀药品注意防护。 移液枪的使用 ?移液枪的操作方法 设置移液体积：手柄的显示窗清楚地显示移液器所移液量。移液量通过顺时针或逆时针旋转操作按钮来设置。 装配吸头：在装配吸头前要保证移液嘴连件的清洁。将吸头紧紧按在移液器吸液嘴连件上，确保密封完好，其标志是在吸头与黑色吸液嘴连件形成清晰的密封圈。 吸液和放液：?吸液时移液器保持竖直，吸头尖端没入液面下3毫米以下进行吸液。放液时吸头尖端可靠在容器内壁。慢吸慢放，始终用拇指控制按钮运动，以保证连贯一致。 丢弃吸头：移液后，用力向下按动推出器推出吸头，将吸头丢弃到废物缸中。 放置好移液器：移液枪用完之后要归到最大计量的位置，并放置在移液器架之上。 移液枪的使用 注意事项： ??? (1)吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指，绝不允许突然松开，以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。 ?(2)为获得较高的精度，吸头需预先吸取一次样品溶液，然后再正式移液，因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层”液膜”，造成排液量偏小而产生误差。 ??? (3)浓度和粘度大的液体，会产生误差，为消除其误差的补偿量，可由试验确定，补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。 ??? (4)可