抗微生物药的实验.doc

抗微生物药的实验 实验五十三 磺胺类药物抗菌机理的初步分析 目的 观察磺胺类药物体外抑菌作用，进而理解本类药物的抗菌作用机理。 实验材料 器材——臼金耳、玻璃笔、镊子、灭菌培养皿、灭菌圆形滤纸片（直径6mm）、恒温箱、牛肉汤培养液、血琼脂培养基。 药品——4%、1%磺胺噻唑钠溶液，用0.5%对氨基苯甲酸溶液配制的4%、1%磺胺噻唑钠溶液。 动物——溶血性链球菌。 实验方法 取溶血性链球菌一金耳，洗入1mL冲肉汤培养被中。以此菌液接种在血琼脂培养皿中，然后再取无菌滤纸片4张（圆形、直径6mm）。分别浸入4%、1%磺胺噻唑钠溶液。待全部浸温后用无菌镊夹出，贴在己接种溶血性链球菌的血琼脂培养皿中，用玻璃笔做好标记。然后放在37℃温箱内培养24小时后观察各区细菌的生长情况。比较各滤纸片周围制菌圈的大小。 实验记录 反应 药物 抑菌圈（mm） 磺胺噻唑钠 对氨苯甲酸＋磺胺噻唑钠 讨论题　　根据滤纸片抑菌圈大小不同，说明其道理。 注：试验中所用的培养基可按照药典中规定制备。 实验五十四 磺胺类药物的溶解性试验 目的　观察磺胺类药物在酸、碱环境中的溶解度，明了磺胺类药物的溶解受PH值直接影响。 实验材料 器材——试管、试管架、玻棒、试纸、滴管、天平。 药品——SD粉、1NNaOH液、1/4NHCl液、蒸馏水。 实验方法 取SD粉0.02g放入10m1试管中，加蒸馏水2mL，剧烈振荡数分钟，观察能否溶解。然后用滴管吸取1NNaCH液向上述试管内滴加，随摇随加，直至药物溶解为止，测其pH值。 再慢慢滴加1/4N盐酸，随滴随摇，可见溶解液混浊，当絮状小片出现时，再测其pH 值。 讨论题　　从SD粉溶解和SD溶液析出结晶看，临床上肾小管内磺胺结晶的形成与什么有关？ 实验五十五 家兔尿中磺胺药含量的测定 目的 观察和熟悉磺胺类药物含量的测定方法。 实验材料 器材——台秤、集尿笼、灌胃管、100mL容量瓶、滤纸、试管、试管架、玻璃笔、酒精灯、三角架、石棉网、吸管（1mL、2mL）、火柴。 药品——5%磺胺噻唑混悬液、1NNaOH液、蒸馏水、1NHCl液、0.5%亚硝酸钠溶液， 以20%NaOH为溶剂配制的0.5% 麝香草酚溶液 动物——雄兔。 实验方法 取兔一只，称重。预先饮水后置于集尿笼中收集正常尿液。然后由胃灌入5%磺胺噻唑混悬液20mL/kg。收集并记录12小时内尿液备用。 取用药前及用药后的尿液各5mL，分别置于两个100mL容量瓶内，各加入1N 氢氧化钠1m1，并加蒸馏水至100mL，（如尿量不足可按比例加）。经过滤除过磷酸盐即得尿滤液。 取试管3支。甲管盛用药前尿滤液5mL；乙、丙管各盛用药后尿滤液5mL。然后甲、乙、丙管均加入1N盐酸2mL，振摇。 用玻璃笔在丙管液面处划一记号，然后置沸水中煮沸30分钟，使乙酰化磺胺噻唑充分水解。冷却后加蒸馏水补足原量。 接着于3支试管内均加入0.5%亚硝酸钠溶液1mL，并摇匀。 待3分钟后，3支试管内加入以20%氢氯化钠为溶剂配制的0.5%麝香草酚溶液2mL，观察有何变化发生。 将此3管与磺胺噻唑钠系统标准比色管进行比较，并按下式计算结果。 12小时内排出的磺胺量(g)=尿中磺胺浓度(mg%)×12小时尿量(mL)×稀释倍数（55-1） 乙酰化磺胺量=丙管量－乙管量　　 （55-2） 利用式（55-1）、（55-2）计算本实验12小时内尿中排出的磺胺噻唑、游离磺胺及乙酰磺胺的含量。 注：①本实验稀释倍数为20。 ②甲管应无ST存在；乙管为游离ST；丙管为乙酰化磺胺加游脑磺胺的总和。 附：磺胺噻唑钠系统标准比色制备： 取8支试管。第1-7管内各加入已知量的磺胺噻唑钠溶液1mL（含量依次为100mg%、 80mg%、60mg%、40mg%、20mg%、10mg%、5mg%），第8管加蒸馏水1mL作对照。 然后分别于各管加入蒸馏水8mL、1－2NHCl 1mL，0.5%NaNO2 1m1，以20%NaOH溶剂配制的0.5%靡香草酚溶液2mL。各种药物加完后，要充分振摇试管，可呈一系由深至浅的橙红色标准比色管。（若置入光电比色管中比色，可得出密度D读数。在方格纸上可画出标准曲线。纵坐标代表光密度（D），模坐标代表浓度（mg%）。 讨论题　从实验结果分析，以ST为代表的可溶性磺胺药物的主要排泄途径是什么? 实验五十六 磺胺类药物的组织分布 目的　通过实验加深理解磺胺药物的分布，以便合理指导临床用药。 实验材料 器材——