第六章培养基.ppt

培养基 概念：人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成各种代谢产物的营养物质 影响： 产生菌的生长发育 发酵单位的增长 成品的质量 提炼工艺 第一节 培养基的成分及其功用 组成： C 源、N 源、无机盐（包括微量元素）、水、生长因子和前体等成分 一、C 源 功能：提供能源 构成菌体成分 抗生素合成所需的碳成分 种类：糖类（常用）、脂肪和有机酸 （一）糖类： 1、单糖（葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖） 葡萄糖是最易吸收利用的碳源（快速碳源） 不利：过度呼吸、葡萄糖效应 2、双糖（蔗糖、乳糖） 蔗糖以糖蜜的形式供应，乳糖利用缓慢 3、多糖（淀粉、糊精） 淀粉、糊精等也是常用的碳源，一般经胞外酶水解成单糖后被吸收利用 注意缓慢利用与快速利用混合碳源的使用 快速碳源和慢速碳源对红霉素发酵的影响： 发酵初期较高浓度葡萄糖有利于菌丝体(孢子)萌发、生长和大量繁殖。在同样的发酵周期内,缩短了营养期(即生长期) 葡萄糖可以产生碳分解代谢物阻遏效应 合成红霉素(即生产期)主要利用的是的淀粉 葡萄糖和淀粉二者的配比是优化红霉素产生菌种工艺,提高红霉素发酵效价的一个重要措施 （二）油和脂肪 双重作用 油和脂肪→甘油、脂肪酸→CO2+H2O （三）有机酸 乳酸、琥珀酸、枸橼酸等及其盐 CH3COONa+2O2 → 2CO2+H2O+NaOH 二、N 源 功能：构成菌体成分 含N抗生素的氮来源 种类：有机 N 源和无机 N 源两类 （一）有机 N 源（利用缓慢） 多为天然有机物：黄豆饼粉、花生饼粉、棉子饼粉、玉米浆、蛋白胨、酒糟、鱼粉、蚕蛹粉等 含有丰富的蛋白质、蛋白胨、多肽和游离氨基酸外，还含有少量糖类、脂肪、无机盐，是微生物的良好营养物质，促进菌丝生长旺盛 几种常用的有机N源 1、黄豆饼粉： 是发酵工业中首选的有机N源 黄豆的不同产地、以及加工方法都会对发酵产生很大影响 2、玉米浆： 是用亚硫酸浸泡玉米的水经过浓缩加工而成 因含有丰富的氨基酸、还原糖、磷微量元素和生长素，是一种很容易被微生物利用的良好N源 3、蛋白胨： 由动植物蛋白经酶、酸、碱水解而获得的胨、肽、氨基酸组成的水溶性混合物，经真空干燥制得的干制品。 4、尿素： 是一种成分比较单一的有机N源 抗生素发酵工业上氮源的来源十分丰富，在选择氮源时，应当注意根据生产的实际结合每种氮源的特性作出选择。 （二）无机 N 源（利用快速） 常用的无机N源： 铵盐如氯化铵、硫酸铵、硝酸铵 硝酸盐如硝酸钠、硝酸钾 氨水 无机氮源对抗生素合成的影响 起始阶段过量的快速氮源或硝酸盐强烈地抑制红霉素的生物合成。 培养基中残留无机氮源水平是红霉素生物合成的一个关键调节因素。 从红霉素生物合成角度讲,无机氮源水平低些好,但是从菌丝体生长来看,过低的无机氮源不利于菌丝体的生长 借助吸附缓释原理,把无机氮储藏在一个“库”中缓慢地释放。培养基中无机氮源浓度高时将其纳入“库”中,菌丝体生长需要时又可自如地吐出来。 捕集器：借助磷酸三钙、沸石对ＮＨ+4的独特吸附和释放作用,将二者按5∶1混合配成吸附和吐纳效果很好的捕集剂,对发酵液中游离无机氮源进行控制,可使抗生素生物合成量适当提高15%～29% 培养基中无机N源被微生物迅速利用后经常会引起pH值变化如： 生理酸性物质：经微生物代谢后能形成酸性物质的无机N源 生理碱性物质：经微生物代谢后能形成碱性物质的无机N源 正确使用生理酸碱性物质，可以稳定、调节培养基的pH值 氨水: 经常被作为pH调节剂起作用 发酵过程中补充N源的一种，能被迅速利用 注意少量多次加入，以防培养基pH值急剧升高，并加强搅拌。 注意防止污染（嗜碱微生物的存在） 三、无机盐类 可分为主要元素和微量元素两大类 主要元素有P、S、K、Mg、Ca、Na、Fe等 微量元素（含量低于0.01％）如Cu、Zn、Mn、Mo、Co等 无机盐类是构成微生物菌体的重要成分，在调节微生物生命活动方面也起着很大的作用 功能：构成菌体原生质的成分（P、S） 作为酶的组成成分或维持酶活性（如P、 Mg、Fe、Ca） 调节细胞的渗透压（K、Na） 参加抗生素的生物合成（P、S、Cl等） P 含量的控制对发酵产抗生素有重大影响。过低不利于菌体生长，过高可抑制抗生素的合成 许多抗生素只能在低于对生长最适的无机磷酸盐浓度下产生。例如，0.3-500 mmol/L磷酸盐可促进细胞良好生长,而10 mmol/L磷酸盐往往会抑制抗生素的合成 S:存在于细胞蛋白质中,