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基础课时案41　植物组织培养 　　　　　　　　　　　　　　　　　　1．(2014·山东聊城一中调研，22)在植物组织培养过程中，激素的添加已成为一种常规的实验手段，在植物组织培养过程中已研究过的植物激素有：生长素、细胞分裂素、赤霉素等。下表为某同学研究激素的使用顺序对实验结果的影响，请回答相关问题： 使用顺序 实验结果 先使用NAA，后使用KT 有利于细胞分裂，但细胞不分化 先使用KT，后使用NAA A 同时使用 B (1)植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、________和________的关键性激素。该实验中属于细胞分裂素类的是________。 (2)请将表格中空白处A和B补充完整，A为________，B为__________。若NAA和KT的用量比值适中时，促进________的形成。 (3)用于离体培养的植物器官或组织称为________。若该实验材料为菊花，则应对其进行________(消毒/灭菌)。 (4)接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养环境应注意调节合适的________和________。接种过程要注意在________旁进行。 解析　(1)生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，NAA属于生长素类，KT属于细胞分裂素类。(2)先使用NAA，后使用KT，有利于细胞分裂，但细胞不分化；先使用KT，后使用NAA，细胞既分裂又分化；NAA和KT同时使用，分化频率提高；NAA和KT的用量比值适中时，有利于愈伤组织的形成。(3)用于离体培养的植物器官或组织称为外植体，组织培养过程中应对外植体消毒。(4)接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应注意调节温度和光照时间，接种过程要注意在酒精灯火焰旁进行，以免杂菌污染。 答案　(1)脱分化　再分化　KT　(2)细胞既分裂又分化 分化频率提高　愈伤组织　(3)外植体　消毒　(4)温度 光照时间　酒精灯火焰 2．(2014·湖北武汉高三调研)下面是关于月季花药培养的相关问题，请回答下面的问题。 (1)通过花药培养产生花粉植株一般有两种途径：一种是花粉通过________发育成植株；另一种是花粉在诱导培养基上先形成________，再将其诱导分化成植株。两条途径主要取决于培养基中________。 (2)通常选择________的花蕾作为实验材料，对花药取样后用________对其染色，镜检发现大多数的花粉含有两个核，该时期花药________(适宜、不适宜)进行接种。 (3)在花药培养过程中发现：接种花药的培养基中，花药边缘出现杂菌，其余部分正常，未接种的培养基正常。出现该现象的原因最可能是______________。 (4)花药培养在育种上有特殊意义。采用花药培养的方法，可使花药粒发育成________倍体植株，在经过人工诱导________，使其能够正常生殖。该育种技术的最大优点是________。 解析　(1)花药离体培养可以有两条产生植株的途径，除了花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株的途径外，还可以通过胚状体进一步分化产生植株。两种发育途径主要取决于激素的种类及浓度比。 (2)通常选择完全未开放的花蕾作为实验材料，可以用醋酸洋红或龙胆紫溶液对花药进行染色，如果镜检发现大多数的花粉含有两个核，则该时期花药不适宜进行接种。 (3)如果在接种花药的培养基中发现花药边缘出现杂菌，其余部分正常，未接种的培养基正常，出现该现象可能由于花蕾消毒不彻底。 (4)采用花药培养的方法获得的植株是单倍体植株，再经过人工诱导染色体加倍，使其能够正常生殖。单倍体育种最大优点是缩短了育种周期。 答案　(1)胚状体阶段　愈伤组织　激素的种类及其浓度配比　(2)完全未开放　醋酸洋红　不适宜　(3)花蕾消毒不彻底　(4)单　染色体加倍　缩短了育种周期 3．矮牵牛是观赏花卉，生产上常用组织培养繁殖，下表是在不同条件下矮牵牛不同部位组织培养的结果。请结合实验结果和有关知识回答下列问题。 外植体 浓度/(mg·L－1) 一周后 1月后 40 d后 6－BA NAA 丛芽 不定根 叶 2 0.2 愈伤组织 大量 无 大量无根试管苗 0.5 0.2 愈伤组织 少量 少量 少量试管苗 0 0.2 愈伤组织 无 大量 大量不定根 0 0 愈伤组织 无 无 死亡 茎尖 2 0.2 愈伤组织 大量 无 大量无根试管苗 茎段 2 0.2 外植体膨大 愈伤组织 大量丛芽 (1)培养基接种前需要对外植体进行________处理，培养基进行________处理，以防止污染。 (2)从表中结果可知，选择________作外植体，6－BA浓度为________，NAA浓度为________时可以获得大量的无根试管苗。 (3)培养基