石蜡切片法（三）切片、贴片.ppt

* 实验十四 石蜡切片法（三） 切片、贴片 一、实验原理 ? 切 片 是把包埋好的材料块用切片机切成所需厚度的 切片带。 ? 贴 片 是用粘贴剂把切片平铺贴在载玻片上，以便 于染色。 二、试剂与器材 1.试 剂：Haupt’s明胶粘片剂。 2.器 材：切片机、 切片刀、 单面刀片、 酒精灯、 蜡铲、台木、 毛笔、 蜡带盘、 载玻片、 镊子、 滴瓶、展片台。 三、实验程序 （一）切片 1. 切片前的准备工作 （1）石蜡块的固着：先将蜡块用刀片切成方形或 长方形，组织四周留下2—3mm宽的石蜡。点燃酒精 灯，然后用烤热的蜡铲放在台木和蜡块之间，利用蜡 铲的温度熔化两者的蜡，把蜡块粘附在台木上。 （2 ）整修：用单面刀片将蜡块四周修整平行。 2.切片机 切片机的式样很多，一般常用的为轮转式切片机，这 种切片机的夹物部分是上下移动，前后推进的，而夹刀 部分则固定不动。通过调整控制刀片厚度的微动装置就 可以切出不同厚度的连续切片。 3．切片的方法 （1） 将已固定和修好的石蜡块台木装在切片机的夹物台上。 （2） 将护刀盖推至打开位置。 （3） 摇动快速进退手轮，使石蜡块与刀口贴近，但不超过刀口。 （注意：在转动手轮时，应保证机头在红、绿线之间移动。） （4） 调整石蜡块与刀口之间的角度与位置，刀片与石蜡切片约 成15-30度。 （5） 调整厚度调节器到所需的切片厚度，一般4-10微米。 （6） 一切调整好后就可以切片。此时右手摇动大手轮，左手持毛 笔将蜡带提起，摇转速度以每分钟40-50转为宜。 （7）切成的蜡带到20-30厘米时，右手用另一支毛笔将蜡带挑 起，平放在蜡带盘上（注意：靠刀面的一面较光滑朝下）。 （二）贴片 1．取一清洁的载玻片，滴一小滴粘片剂于玻片中央， 用手指涂抹均匀。 2．滴1-2滴蒸馏水于已涂粘片剂的载玻片上。 3．用刀片割一小段蜡带，放在水面上。注意蜡片光面 贴于玻片上。并使之偏玻片的一端，另一端贴标签。 4．把玻片标本置于展片台上（温度保持在40-45oC）， 直到蜡片伸展摊平。 5．展片后把玻片标本编好记号，放在平盘上。 ? *