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生化工程 课程串讲 第二章 培养基灭菌 第一节??? 分批灭菌 ln(N/N0 ) = -K t 灭菌动力学的重要结论 细菌孢子热死灭反应的△E很高，而大部分营养物质热破坏反应的△E很低，因而将T提高到一定程度会加速细菌孢子的死灭速率，从而缩短在升高温度下的灭菌时间（ ln(N/N0 ) = - K t ）；由于营养成分热破坏的△E很低，上述的温度提高只能稍微增大其热破坏温度，但由于灭菌时间的显著缩短，结果是营养成分的破坏量在允许的范围内。 2、分批灭菌的设计 要求绝对的无菌在工业上很难做到， 因为： 第一节??? 分批灭菌 二 分批灭菌的设计 分批灭菌过程：升温、保温和降温，灭菌主要是在保温过程中实现的，在升温的后期和冷却的初期，培养基的温度很高，因而对灭菌也有一定贡献。 第二节??? 连续灭菌 一、连续灭菌方法 与间歇灭菌相比，连续灭菌的优点： 1 升温和降温速度快 2 灭菌温度高，保温时间短 3 蒸汽用量平稳 缺点： 1 设备复杂，投资大。 返混现象 ： 反应器中停留时间不同的物料之间的混合称为返混。 按照返混的程度，在化学工程中建立了两种理想的连续流动反应器模型。 连续搅拌罐（CSTR）和活塞流反应器（PFR）反应器 第二节??? 连续灭菌（1）PFR模型（活塞流模型）plug flow reactor 恒温热灭菌状况： 1 同一截面上活孢子浓度（N）相等，热死灭速率相等。 2 沿流动的方向，活孢子浓度（N）下降，热死灭速率也相应下降。 第二节??? 连续灭菌（4）扩散模型 返混：是不同反应时间的物料之间的混合。 PFR：返混程度最小 CSTR：返混程度最大 高/径↑，返混程度↓ 高/径↓，返混程度↑ 实际操作的大部分反应器都介于这两种理想的反应器之间。 第三章 空气除菌 1、空气除菌的目的及重要性 在好氧深层培养中，微生物细胞的繁殖代谢需要溶解氧，因为有氧氧化对生物体来说是能量放出最多的途径。 在该过程中脱去了很多H，H经电子传递链，最后被O2吸收，所以要提供氧。现在深层培养都是纯种培养，培养基接种之前都经过灭菌，通入的氧气也应是无菌的。 第三节?????空气过滤设计 空气过滤器使用的过滤介质，按其孔径大小可分为二类： 1)?绝对过滤介质： 绝对过滤介质的孔隙小于细菌和孢子，当空气通过时微生物被阻留在介质的一侧。 2)?深层过滤介质： 深层过滤介质的截面孔隙大于微生物，为了达到所需的除菌效果，介质必须有一定的厚度，因此称为深层过滤介质。 一、深层过滤原理 1、惯性冲撞机制（ η1 ）（大颗粒） 气流中运动的颗粒，质量，速度，具有惯性，当微粒随气流以一定的速度向着纤维垂直运动时，空气受阻改变方向，绕过纤维前进，微粒由于惯性的作用，不能及时改变方向，便冲向纤维表面，并滞留在纤维表面。 η1 2、阻截（截留）机制（η2） （小颗粒） 阻截机制对阻截小颗粒比较有效。 细菌的质量小，紧随空气流的流线前进，当空气流线中所携带的颗粒和纤维接触时被捕集。 截留微粒的捕集效率几乎完全取决于微粒的直径，和气流速度关系不大。 3、布朗扩散机制 二、深层过滤计算 要解决的问题是：处理空气量为Q时，含菌个数No的空气要达到 N=10-3，需要的介质层厚度L=？ 那么 与 L 的关系怎样？ 有学者作了实验：测定 与L之间的关系。 ? 第四节? 其它空气灭菌方法 1 热灭菌法 2 射线杀菌 3 静电除菌 第四章 通气与搅拌 三、影响微生物需氧量的因素 1.碳源种类 碳源种类不同，利用速度不同。 C6H12O6+6O2＝6H2O+6CO2 2.碳源浓度 与碳源浓度是否成为限制性有关 第5章 生物反应器的比拟放大 一般说来，菌种的接入方式、菌龄、接种量、培养基组成、加料方式、pH值、操作温度、罐压、溶氧速率、搅拌混合强度等因素，都不同程度地影响细胞的反应过程。 5. 1 几何尺寸放大 在反应罐的放大中，放大倍数实际上就是罐的体积增加倍数。 放大倍数 m=V放大/V模型 一般要保持几何相似的原则，那么 H1/D1=H2/D2=A(常数) V2/V1=(D2/D1)3=m D2/D1=m1/3 (H2/H1)3=m H2/H1= m1/3 5.2 空气流量放大 生物反应中空气流量一般有两种表示方法： ?1．以单位培养液体积在单位时间内通入的空气量VVM（标准状态）来表示 （m3/ m3· h） 2．以操作状态下的空气直线速度Vs表示，m/min 两种空气流量表示方式可以换算。 整理出: (VV