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石河子大学毕业论文 题目：地区市售部分动物产品中盐酸克伦特罗和磺胺类药物 残留情况的调查与分析 院 （系）： 动物科技学院 专 业： 动物医学 学 号： 2010513142 姓 名： 王 凯 喆 指导教师： 李 劼 （副教授） 完成日期： 2014年5 月 10日 某地区市售部分动物产品中盐酸克伦特罗和磺胺类药物残留情况的调查与分析 学生：王凯喆 导师：李劼 摘 要：用ELISA法对某地区市售部分动物产品中盐酸克伦特罗和磺胺类药物残留检测，抽取猪肝40份，鸡肝20份，鸡肉20份。结果表明：盐酸克伦特罗猪肝阳性样品40个，阳性率为100%，残留量浓度范围在0.32μg/kg～0.65μg/kg；磺胺七合一猪肝阳性样品40个，阳性率为100%，残留量浓度范围在0.80～22.40μg/kg，鸡肝阳性样本20个，阳性率为100%，残留量浓度范围在1.30～3.30μg/kg鸡肉阳性样本20个，阳性率为100%，残留量浓度范围在,1.40～3.40μg/kg。 关键词：猪肝；鸡肝；鸡肉；克伦特罗；磺胺；ELISA 前言： 随着养殖业的集约化、规模化发展，各种动物疫病不断暴发，养殖场为预防和控制动物疫病，大量使用各种兽药。滥用兽药和非法使用违禁药物的现象时有发生，严重影响了畜禽产品的质量和食品安全。因此，开展兽药残留的检测与调查，对于提高人民健康水平，加强畜禽产品的市场竞争力有着重要意义，也为兽药残留的科学研究提供了基础性资料。 盐酸克伦特罗（Clenbuterol，简写 CL），是一种β受体激动剂，具有松弛气管平滑肌作用，用于治疗哮喘，所以盐酸克伦特罗又称氨哮素、克喘素。20 世纪80年代初，科学家发现盐酸克伦特罗进入体内后，可明显促进动物生长，并增加瘦肉率，所以又称其为“瘦肉精”。但因其在动物体内代谢缓慢，人食用含有盐酸克伦特罗的畜产品，可引起蓄积中毒，导致呕吐、心跳骤然加速等异常生理反应，严重者会造成死亡，因此我国禁止使用[4]。畜产品中盐酸克伦特罗残留检测的主要方法有液相色谱 - 质谱法（LC/MS）、气相色谱 -质谱法（GC/MS）、高效液相色谱法（HPLC）、毛细管区带电泳法（CE）、酶联免疫吸附法（ELISA）、胶体金免疫层析法（GICA）等 6 种方法。ELISA、GICA 是农业部发布的盐酸克伦特罗定性和半定量检测方法。 磺胺药物( SAs) 是一类广泛使用的预防性和刺激动物生长(常作饲料添加剂)的抗生素。由于磺胺类药物抗菌谱较广、价格低廉、性质稳定、使用方便，至今仍是畜禽抗感染治疗中的重要药物之一。临床上常用的有20多种，磺胺药物通过各种给药途径进入动物体后，如果使用不当，可造成药物在动物组织中的残留，并可转移到肉蛋乳等各类动物性食品中。一方面，残留的药物可能对人的健康造成潜在的危害，主要表现在细菌的耐药性过敏反应与变态反应致癌致畸致突变等作用；另一方面，兽药残留问题也是目前动物性食品贸易中的主要障碍[6]。 本次试验采用酶联免疫吸附剂测定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）对石河子地区上市的肉类产品中的盐酸克伦特罗、磺胺类药物含量进行了定量分析，首次揭示了石河子地区肉类产品中盐酸克伦特罗、磺胺类药物的残留现状，为消费者的食用安全及食品质量监控部门提供了重要的科学参考资料。 材料与方法 1.1　材料 于2013年6月在玛纳斯县农贸市组织， 左右，鸡肝组织，鸡肉组织分析数据。Clenbuterol） 磺胺“七合一”ELISA检测试剂盒（北京秦邦生物技术有限公司）电子分析天平、酶标仪(DNM-9602)、MTN-2800W氮吹仪nke TGL-16GB离心机等。 1.2.2　检测步骤 1.2.2.1　样品制备 称取2.0±0.5g均质的组织样本至离心管中，ml2%NaCl-0.2 mol/L HCl-甲醇混合液，r/min，室温离心min。取0.5ml上清液加入ul 0.5mol/L氢氧化钠，加入ml复溶工作，取ul用于分析。 .2.2　操作步骤 所需试剂从冷藏环境中取出。20μl标准溶液(0，0.05，0.15，0.45，1.35和4.05ppb)；在另外的微孔中加入20μl已完成前处理的样品溶液；将抗体工作液和酶标二抗液按混匀，ul/孔，震荡混匀，盖板膜盖板后置于中反min。洗版，小心盖板膜，将孔内液体甩干，用去离子水洗涤-5次，间隔吸水纸拍干（未被清楚的气泡可用未使用的戳破），加入底物，再加入底物，轻轻震荡混匀，用盖板膜盖板后置于中反10min；测定，加入终止液，轻轻震荡混匀，酶标仪nm双波长检测，min中内读完数据）