人参炮制对其化学成分的影响.docVIP

人参炮制对其化学成分的影响 　　摘 要：本文采用高校液相测定了人参不同炮制品中人参皂苷的含量，固定相为：安捷伦Cl8（4.6mm×250mm，5um），以乙腈（A）-水（B）为流动相，梯度洗脱[0min（19%A）→35min（19%A）→55min（29%A）→70min（29%A）→100min（40%A）为流动相，检测波长为203nm，流速1.0mL?min-1，柱温：30℃。此方法简便、准确、重现性好，可用于人参不同炮制品中人参皂苷的含量测定。实验结果表明，人参皂苷Rbl、人参皂苷Rgl和人参皂苷Re的总量生晒参红参糖参。 　　关键词：人参；炮制；含量 　　人参学名Panax ginseng，又称为亚洲参，在中国东北土名“棒槌”，用于愈后恢复、增强体力、调节荷尔蒙、降低血糖和控制血压、控制肝指数和肝功能保健等。人参具有大补元气，复脉固脱，生津止渴，安神益智等功效。人参常用于劳伤虚损、食少、虚咳喘促、健忘、眩晕头痛、倦怠、反胃吐食、大便滑泄、阳痿、尿频、消渴、妇女崩漏等症。人参皂苷主要有抗肿瘤、抗老年痴呆、调节肝功能、抗氧化、抗炎等作用[1-5]。本文采用高校液相测定了人参不同炮制品中人参皂苷的含量。 　　1 仪器与试药 　　HH-601超级恒温水浴（江苏金坛市亿通电子有限公司）；LC-310液相色谱系统（江苏天瑞仪器股份有限公司）；便携式PH计（北京恒奥德仪器仪表有限公司）；HQ-50高端试剂级超纯水机（郑州华新电气公司）；B200 迷你型超声波清洗机（上海恒奇仪器仪表有限公司）；FA1004万分之一分析天平（上海书培实验设备有限公司）。人参皂苷Rbl、人参皂苷Rgl和人参皂苷Re对照品由中国药品生物制品检定所提供。乙腈（乐平市鑫水淼化工有限公司）、磷酸（济南诚源化工有限公司）、甲醇（乐平市鑫水淼化工有限公司）、三乙胺（济南诚源化工有限公司）、磷酸二氢铵（乐平市鑫水淼化工有限公司）。 　　2 炮制方法 　　2.1 生晒参：取原药材，除去芦头，洗净，润透，切薄片，干燥。 　　2.2 糖人参：取园参鲜根洗净，置沸水中浸烫3～7分钟，取出，人凉水中浸泡10分钟左右，取出，晒干，用特制的针沿参平行与垂直方向刺小孔后，浸入浓糖液中（每100ml水溶液中加冰糖135g），24小时，取出后暴晒1天，再用湿毛巾打潮，使其软化，进行第二次刺孔，再浸入浓糖液中24小时，取出后冲去浮糖，干燥。 　　2.3 红参：取原药材洗净，经蒸制后，切薄片，干燥。 　　3 含量测定 　　3.1 色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下。色谱柱为安捷伦C18规格为（4.6mm×250mm，5um）；流动相以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为203nm；流速1.0mL?min-1；柱温：30℃。理论板数按人参皂苷Rbl峰计算应不得低于2000。 　　3.2 供试品溶液的制备 　　取人参不同炮制品，甲醇超声处理30分钟，滤过蒸干，适量水微热溶解，而后那氯仿萃取3次，弃去氯仿层，水层拿水饱和正丁醇萃取4次，将正丁醇层用正丁醇饱和的氨试液洗3次，正丁醇层蒸干，用5毫升甲醇溶解，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 　　3.3 对照品溶液的制备 　　精密称取人参皂苷Rbl、人参皂苷Rgl和人参皂苷Re对照品各5mg，用甲醇溶解并稀释成每1ml中含200？滋g的混合溶液，作为对照溶液。 　　3.4 精密度试验 　　依照3.3项下制备对照品溶液，精密吸取人参皂苷对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.52%，0.63%，0.56%。结果表明，本实验精密度良好。 　　3.5 重现性试验 　　称取同一批的人参炮制品样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.66%，0.52%，0.61%，结果表明此方法的重现性良好。 　　3.6 稳定性试验 　　依照3.2项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在0，2，4小时精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品人参皂苷峰面积积分值的RSD为0.55%，0.61%，0.56%。结果表明人参皂苷Rbl、人参皂苷Rgl和人参皂苷Re至少在4小时内稳定。 　　3.7 回收率试验 　　采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的人参皂苷Rbl、人参皂苷Rgl和人参皂苷Re对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。6次测定的平均回收率为99.3%，99.5%，99.1%，RSD为0.73%，0.69%，0.83%。 　　3.8 样品含量测定 　　依照上述含量测定方法，测定人参