基于ITS条形码序列对枸杞杂交种的早期鉴定.docVIP

基于ITS条形码序列对枸杞杂交种的早期鉴定 　　摘要：采用改进CTAB法提取枸杞（Lycium Linn）叶片DNA，利用合成的特异引物对其DNA中nrDNA ITS区进行扩增、克隆，对目的片段进行测序分析，以期利用ITS条形码序列对枸杞杂交种进行早期鉴定。结果表明，7份枸杞属不同种间杂交种的ITS序列长度变异范围为558～632 bp，平均为610 bp。排序后的总长度为632 bp，整个转录间隔区（ITS1+ITS2）对位排列后总长度为478 bp，共有138个变异位点，ITS1和ITS2分别为85和53个，占28.9%；保守位点340个，占71.1%；有6个信息位点，占1.3%；51个转换位点，12个颠换位点，其中ITS1区的信息位点所占比例低于ITS2区，而ITS1区的转换位点与颠换位点比值高于ITS2区。通过对宁夏枸杞、北方枸杞、黑果枸杞及其种间杂交育种产生的杂交后代分析，得出基于ITS聚类分析能够初步判别杂交后代与父母本的亲缘关系与差异，可以作为早期鉴定枸杞属不同种间杂交种后代的方法之一。 　　关键词：枸杞（Lycium Linn）；ITS序列；鉴定；杂交育种 　　中图分类号：S567.1+9 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）19-5075-03 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.1