第1章 基因工程 单元归纳教案（苏教版选修3）.docVIP

与核酸有关的各种酶的比较名称 作用 参与生理过程应用 作用位点(如图) DNA连接酶 连接两个DNA片段 基因工程 a 限制性核酸内切酶 切割某种特定的脱氧核苷酸序列 a DNA聚合酶 在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧核苷酸 DNA复制 a RNA聚合酶 在核糖核苷酸链上添加单个核糖核苷酸 转录及RNA复制 解旋酶 使碱基间氢键断裂形成单脱氧核苷酸链 DNA复制及转录 b 逆转录酶 以RNA为模板合成DNA 逆转录、基因工程 a 作用位点示意图 　下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是(　　) A．①②③④　　　 B．①②④③ C．①④②③ D．①④③② 【解析】　将DNA分子切割成含有黏性末端的两个DNA片段的是限制性核酸内切酶，即①；DNA聚合酶则可以催化DNA单链的合成，即④；DNA连接酶可以连接具有相同黏性末端或平口末端的两个DNA片段，即②；解旋酶催化DNA双螺旋氢键的断裂，使DNA分子解旋，即③。 【答案】　C DNA复制、PCR技术和DNA重组技术的比较 　　　　 　 DNA复制 PCR技术 DNA重组技术 场所 细胞核 生物体外 生物体外 酶 解旋酶、DNA聚合酶 DNA聚合酶 限制性核酸内切酶、DNA连接酶 载体 不需要 不需要 需要 遵循原则 碱基互补配对 碱基互补配对 碱基互补配对 结果 DNA分子 DNA分子片段 DNA分子 　(2011·江苏高考)请回答基因工程方面的有关问题。 (1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片断，它是子链合成延伸的基础。 ①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为________。 ②在第________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。 (2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图)，请分别说明理由。 ①第1组：__________________________________； ②第2组：_____________________________________。 (3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为________。 (4)用限制酶EcoR V、Mbo Ⅰ 单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb即1 000个碱基对)，请画出质粒上EcoR V、Mbo Ⅰ的切割位点。 【解析】　(1)①依据图解特点，第四轮循环产物中可以得到16个DNA分子，其中有14个含引物A、B的DNA分子，一个只含有引物B的DNA分子和一个只含引物A的DNA分子。②从图解原DNA与引物A、B的比例关系分析，经三次复制后开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。(2)比较第一组引物的碱基顺序，可以发现引物Ⅰ与引物Ⅱ有两对碱基能发生互补配对，形成局部双链结构而失效；而第二组引物中，引物Ⅰ′折叠后会发生碱基互补配对而导致失效。(3)在PCR反应体系中，引物首先与模板DNA单链互补配对形成局部双链DNA片段，然后在DNA聚合酶的作用下将单个脱氧核苷酸依次连接到引物链上。 (4)分析本小题中图解可知，用EcoR V切割质粒只得到长度为14 kb的一个片段，说明该酶在质粒上只有1个切点；同理可以推测Mbo Ⅰ在质粒上有2个切点；由图中可以看出同时用两种限制酶切割时得到了3个片段，由此可以推测限制酶EcoR V的切点在5.5 kb和6 kb之间。具体切割位点见答案。 【答案】　(1)①15/16　②三 (3)①引物Ⅰ与引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效 ② 引物Ⅰ′自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效 (3)DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上 (4)见图 转基因育种和传统杂交育种的比较 杂交育种 转基因育种 原理 基因重组 异源DNA(基因)重组 处理方法 杂交→自交→筛选。先通过两个具有不同优良性状的纯种杂交得到F1，然后再将F1自交，人工筛选获取所需品种 提→装→导→检→选。目的基因的提取，装入载体，导入受体细胞，目的基因的检测与鉴定，筛选出符合要求的新品种 优点 使位于不同个体上的多个优良性状集中于一个个体上，即“集优” 目的性强、育种周期短、克服远源杂交不亲和的障碍，可培育出高产、优质或具有特殊用途的动植物品种 缺点 育种时间长 技术复杂、工作量大、操作繁琐 应用 用纯种高秆抗病小麦与矮秆不抗病小麦培育矮秆抗病小麦 转基因向日葵豆