22ABXDX五分类血细胞仪操作保养规程综述.docVIP

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ABX DX120全自动血细胞分析仪操作程序 1.检测原理 1.1 RBC/PLT 通过电阻抗变化原理测定RBC和PLT。这意味着血细胞通过池内微孔时会产生电场。样品稀释在电解质稀释溶液里(电流导电场),混合后被真空吸引通过校准孔的微孔。两个电极置于微孔两侧,恒定电流不断流过两电极间。当血细胞通过微孔时,它们在两电极之间的电场内产生电阻(阻抗)。测量细胞的电压与细胞的尺寸成比例。由于电流是持续不变的,大细胞会产生更大的电阻,小细胞电阻也小一些(即两电极间的阻抗变化与细胞体积呈正比)。当细胞通过微孔时,电压随着脉冲振幅大小而变化。脉冲被放大、根据尺寸和阈值被引导、聚集、然后连同定标系数进行数学计算给出RBC和PLT的最终数值。 1.1.1结果:单位体积内的细胞数×定标系数。 1.1.2直方图:a RBC: 分布在30fl到300fl间的256通道上。b PLT:分布在2fl到活动阈值间的256通道上。该阈值根据分析区域内出现的小细胞个数而移动。 1.2 HGB 红细胞溶解后释放的血红蛋白与氰化钾结合形成氰化高铁血红蛋白化合物。在550nm波长下,利用分光光度法测出吸光度,测得的吸光度值×定标系数=血红蛋白数值。在闭管自动进样循环中,两次计数池冲洗之间做一个HGB空白,与上次的空白值合并得出最终HGB的空白值(1/5新值,4/5上一次的空白值)。在手工模式下,每个循环都做HGB空白。 1.2.1结果:HGB=Log(空白值/样品值)×K 1.3 MCV、MCH和MCHC 1.3.1 MCV(平均红细胞体积)由RBC直方图直接计算得出。 1.3.2 MCH(红细胞平均血红蛋白含量)根据HGB值和RBC结果计算。结果:MCH(pg)=(HGB/RBC)×10 1.3.3 MCHC(红细胞平均血红蛋白浓度)根据HGB值和HCT值计算。结果:MCHC(g/dL)=(HGB/HCT)×100 1.4 HCT 细胞通过校准孔的微孔产生的脉冲高度与所分析的RBC体积成正比,HCT是利用与MCV相关的函数测得。 1.5 RDW 研究RBC分布可以检测与RBC大小不同相关的RBC异常。RDW(红细胞分布宽度)让你根据细胞数目和平均体积去研究曲线宽度。 1.5.1结果:RDW=KSD/MCV 其中 K=系统常数 SD=通过对细胞分布进行统计研究得出的标准差 MCV=平均RBC体积。 1.6 MPV 研究血小板直方图可直接得出MPV(平均血小板体积)。 1.7 PCT 根据下列公式计算 PCT%=(PLT×MPV)/10000 1.8 PDW PDW(血小板分布宽度)根据PLT直方图来计算。从2fl开始的占PLT总数15%的阈值S1与从活动阈值开始向后的占PLT总数15%的阈值S2之间的曲线宽度代表PDW。 1.9 WBC 计数通道:检测原理与RBC计数方法相同。WBC计数在WBC/HGB通道内进行,信号处理设备在WBC和PLT(和已溶解的RBC)之间置一电子阈值。 1.9.1结果:单位体积内的细胞数×定标系数。计数结果与BASO通道和LMNE通道内的测量结果作对比,以绝对值和百分数形式给出完整的分类结果。 1.10 BASO 检测原理与RBC的方法相同。利用特定的溶血剂(ABX嗜碱溶血剂)在独立的BASO通道内进行计数。血样与ABX嗜碱溶血剂反应后,除了嗜碱性粒细胞之外,全部白细胞失去细胞膜和胞浆,将嗜碱性粒细胞与其他白细胞裸核分开将变得十分容易。从体积坐标轴开始到阈值<1>之间可见细胞溶解后剩余的碎片,从阈值<2>到直方图尾部是嗜碱性粒细胞。WBC总数包括全部裸核数目加上嗜碱性粒细胞。嗜碱性粒细胞百分数根据阈值<2>和上限间的细胞数计算。 1.10.1结果: 1.10.1.1计数细胞(BASO+WBC裸核)总数=单位体积细胞数×定标数×100%; 1.10.1.2 BASO通道的结果也与其它通道(WBC和LMNE)的结果作对比,以绝对值和百分数形式给出完整的分类结果。 1.11双矩阵 双矩阵基于三条原理:① DHSS(双鞘流)原理(ABX专利)② 体积检测:阻抗变化③ 细胞化学法染色和吸光度测量。采样阈LMNE管路内的全血样本注入LMNE池,与ABX嗜酸染色剂混合,此试剂溶解掉RBC,并使WBC 稳定在原始状态并分别染色。在加热池反应/稀释后在进入测量池分析之前,溶液被吸引送到光学反应通道。在双层鞘流作用下,该溶液通过LMNE流式细胞通道的光窗和60um微孔,每个细胞均被检测吸光度(细胞化学法)和阻抗(体积)。通过上述测量以体积为X轴,以吸光度为Y轴绘制WBC散点图。 2.试剂 2.1 稀释液(DILUENT) 2.1.1试剂品牌:ABX,包装规格,20L. 2.1.2

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