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检测板法与HI法测定鸭新城疫抗体比较研究 　　摘要 用新城疫病毒抗体快速检测卡法和血凝抑制试验（HI）同时测定40份鸭血清样品，研究检测板法检测鸭血清的相关关系。结果表明：检测板法和HI法2种方法的阳性符合率为92.59%，阴性符合率为84.62%，阴阳性总体符合率为90%。可见，检测板方法特异、敏感、快速，适用于临床筛查大规模的鸭场新城疫抗体。 　　关键词 鸭新城疫；抗体；筛查；检测板法；HI法 　　中图分类号 S854.4+3 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）14-0257-02 　　Comparative Study on the Detection Method of Plate and HI Method for the Determination of Newcastle Disease Antibody in Duck 　　HUANG Jin-long PAN Shu-lei HUANG Zhao-ling LIAN Yu-bin 　　（Fujian Vocational College of Agriculture，Fuzhou Fujian 350119） 　　Abstract With Newcastle disease virus antibody rapid detection card and hemagglutination inhibition test（HI） for the simultaneous determina-tion of 40 ducks sera，studied correlation detection plate method for detection of duck serum.The results showed that the positive coincidence rate of HI method and detection plate method was 92.59%，the negative coincidence rate was 84.62%，negative and positive generally conforms to the rate of 90%.Obviously，the detection plate method is specific，sensitive and rapid，and is suitable for the clinical screening of large-scale duck farm Newcastle disease antibody. 　　Key words duck Newcastle disease；antibody；screening；detection plate method；HI method 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　鸡新城疫血凝抑制试验抗原、阳性血清、阴性血清，购自青岛易邦生物工程有限公司[1-8]；新城疫抗体快速检测卡，购自某生物科技有限公司；待检血清40份（每份3～4 mL，分离血清置-20 ℃条件下备用），来源于福州永泰、闽清、连江、闽侯、罗源等5个县，均从消毒过的翅静脉采集。 　　1.2 试验方法 　　参照《新城疫诊断技术（GBT 16550-2008）》，具体如下。 　　1.2.1 HI试验方法。采用微量血凝抑制试验。具体包括：①1%红细胞制备。采取3只无禽流感和新城疫抗体的非免疫鸡的抗凝血液，放入离心管中，加入PBS（4倍体积）混匀，2 000 r/min条件下离心8 min，将血浆和白细胞层去掉，重复以上过程，反复洗涤3次，最后吸取压积红细胞用生理盐水（或PBS）配成1%悬液，保存在4 ℃条件下，待用。② HA试验。取96孔V形微量反应板，用微量移液器吸取0.025 mL/孔 PBS加在1～12孔。在第1孔中加入0.025 mL病毒悬液，吹打3次并充分混匀。将第1孔中混匀后的病毒液吸取0.025 mL加到第2孔[3-5]，混匀，再吸取第2孔的混匀液0.025 mL加入到第3孔，依次倍比稀释到第11孔，最后从第11孔吸取0.025 mL弃之，第12孔设为PBS对照。再加PBS 0.025 mL/孔。加入1%鸡红细胞悬液0.025 mL/孔。振荡混匀反应混合液，20～25 ℃下静置40 min后观察结果。如果环境温度太高，放置于4 ℃条件下静置60 min，PBS对照孔的红细胞成明显的纽扣状沉到孔底时判定结果[3-4]。③ 四单位抗原的配置。以血凝试验正确结果判定，以完全凝集的病原最大稀释度的最高稀释倍数为1个血凝单位（HAU）配置四单位抗原。④HI试验。根据血凝试验结果配置4个血凝单位（4HA