2016-2017学年高中生物 专题5 DNA和蛋白质技术 课题3 血红蛋白的提取和分离学业分层测评 新人教版选修1.docVIP

专题5 DNA和蛋白质技术 课题3 血红蛋白的提取和分离学业分层测评 (建议用时：45分钟) [学业达标] 1．下列有关凝胶色谱法的叙述，不正确的是(　　) A．凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法 B．目前经常使用的凝胶有交联葡聚糖、聚丙烯酰胺和琼脂糖等 C．大分子物质后被洗脱出来，小分子物质先被洗脱出来 D．凝胶色谱法的原理是不同大小的分子所经的路径不同而得以分离 【解析】　相对分子质量较小的蛋白质由于扩散作用进入凝胶颗粒内部而使其所经过的路程较长；相对分子质量较大的蛋白质被排阻在凝胶颗粒外面，在颗粒之间迅速通过。因此，大分子物质先被洗脱出来，小分子物质后被洗脱出来。 【答案】　C 2．凝胶色谱法分离蛋白质的原理是(　　) A．根据蛋白质分子与凝胶的亲和力的大小 B．根据蛋白质相对分子质量的大小 C．根据蛋白质所带电荷的多少 D．根据蛋白质溶解度的大小 【解析】　凝胶色谱法所用的凝胶实际上是一些微小多孔的球体，在小球体内部有许多贯穿的通道，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快，从而使相对分子质量不同的蛋白质分子得以分离。故选B。 【答案】　B 3．洗涤红细胞时，离心所采用的方法是(　　) A．低速长时间离心 B．低速短时间离心 C．高速长时间离心 D．高速短时间离心 【解析】　高速或长时间离心，会导致白细胞和淋巴细胞一同沉淀，得不到纯净的红细胞，而影响后面血红蛋白的提取纯度。 【答案】　B 4．对在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作，不正确的是(　　) A．加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐 B．让吸管管口沿管壁环绕移动，贴壁加样至色谱柱顶端，不要破坏凝胶面 C．打开下端出口，待样品完全进入凝胶层后，直接连接缓冲液洗脱瓶，开始洗脱 D．待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5 mL收集一管，连续收集流出液 【解析】　打开下端出口，待样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口，再用同样的方法小心加入适量的20 mmol/L的磷酸缓冲液到适当高度，然后连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口，开始洗脱。 【答案】　C 5．取1 mL血红蛋白溶液装入透析袋中进行透析，相关说法不正确的是(　　) A．透析液为300 mL 20 mmol/L的磷酸缓冲液 B．透析时间至少为1～2 h，时间过长血红蛋白也会渗漏出去 C．缓冲液量远多于血红蛋白溶液量有利于杂质分子充分地向外扩散 D．透析时也可更换样品的缓冲液 【解析】　透析过程除去了相对分子质量较小的杂质，实现了粗分离，更换样品的缓冲液可加强透析的结果；透析时烧杯中加入300 mL 20 mmol/L的磷酸缓冲液，透析时间为12 h，这样可使小分子杂质与血红蛋白充分分离。 【答案】　B 6．有关“血红蛋白的提取和分离”的叙述，正确的是(　　) 【导学号 A．用蒸馏水进行红细胞的洗涤，其目的是去除细胞表面杂蛋白 B．将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较大的杂质 C．血红蛋白释放时要加入有机溶剂，其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂 D．整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持血红蛋白的结构 【解析】　用质量分数为0.9%的NaCl溶液进行红细胞的洗涤，其目的是去除血浆蛋白等杂质，有利于后续步骤的分离纯化；将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较小的杂质；血红蛋白释放时要加入有机溶剂，其目的是溶解细胞膜；整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持血红蛋白的结构。 【答案】　D 7．凝胶色谱法是分离蛋白质分子的一种常用方法，但并非所有的蛋白质都可以用此方法进行分离，能分离的蛋白质分子之间必须(　　) A．具有相同的相对分子质量 B．相对分子质量不同，但都是相对分子质量较大的分子 C．相对分子质量不同，但都是相对分子质量较小的分子 D．具有不同的相对分子质量 【解析】　若在每种凝胶分离范围之外的分子，在不改变凝胶种类的情况下是很难分离的。对于分子大小不同，但同属于凝胶分离范围内的各种分子，在凝胶床中的分布情况是不同的，分子较大的只能进入孔径较大的那一部分凝胶。 【答案】　C 8．凝胶色谱法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是(　　) A．改变蛋白质分子通过凝胶时的路径 B．吸附一部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度 C．将酶或细胞固定在凝胶中 D．与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速度 【解析】　凝胶的种类较多，但每种凝胶内部都有孔隙。相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质分子可以进入凝胶内部，通过的路程较长，洗脱时从凝胶柱中出来的较晚，相对分子质量较大的蛋白质分子则可以较早地洗脱出来，从而达