创新设计-学业水平考试2016-2017高中生物（浙江专用浙科版）选修一 课件 第二部分 酶的应用2-4 .ppt

第4课时　α-淀粉酶的固定化及淀粉 水解作用的检测 【学考报告】 一、酶与固定化酶 1．酶：活细胞产生的具有催化作用的一类有机物，它是生物体内各种化学反应的催化剂。 2．固定化酶：将 的酶用 或 方法 ，使之成为 而又 有 。 3．将酶改造成固定化酶的原因是 由于酶 ，且不利于 ，所以要将酶改造成固定化酶。 4．酶固定化的方法有 法、 法、 法和 法等。本实验用的是 法。 小贴士　酶固定化的方法 ①是吸附法：是将酶吸附到载体表面； ②是共价偶联法：是将酶通过共价键结合到载体的表面； ③是交联法：通过把酶交互连接、相互结合从而将酶固定； ④是包埋法：是将酶或者细胞包埋在细微的网格里。 5．固定化酶作用的机理 将固定化酶 ，当 时，在 的作用下 。 【典例剖析】 下列不属于固定化酶在利用时的特点的是 (　　) A．有利于酶与产物分离 B．可以被反复利用 C．能自由出入依附的载体 D．一种固定化酶一般情况下不能催化一系列酶促反应 解析　本题考查固定化酶的定义和固定化酶作用的特点。固定化酶由于酶被固定在不溶性的载体上，很容易与产品分离，同时酶也能反复使用，这是固定化酶的主要优点。通常固定化酶的种类单一，所以不能催化一系列酶促反应(需要一系列的酶)。 答案　C (1)酶固定化的优点 ①使酶固定化后有一定的机械强度，催化反应的过程可管道化、连续化和自动化。 ②酶不溶解在催化反应的溶液中，产物更易纯化。 ③固定化酶可反复使用，更经济，更利于工业化生产。 ④提高了酶的稳定性或可较长时间地贮存和使用。 (2)酶固定化的缺点 通常固定化酶的种类单一，不能催化一系列的酶促反应。 二、α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测的实验 1．实验原理 将 酶固定在 上，一定浓度的淀粉溶液经过 后，可使淀粉水解成 。用 测试，若流出物呈 色，表明有 生成。 (2)可溶性淀粉溶液 取50 mg可溶性淀粉溶于100 mL 中，搅拌均匀。 (3)KI-I2溶液 3．实验步骤 (1)淀粉溶液流经固定化酶柱 将灌注了 的注射器放在注射器架上，用滴管加 溶液，使该溶液以 mL/min的流速过柱。 (2)接取流出物 待从固定化酶柱中流出 mL的溶液后，接收0.5mL流出液。 (3)流出物鉴定 在流出物中加入 溶液，观察颜色。用水稀释 倍后再观察颜色。 (4)洗涤、保存固定化酶柱 实验后，用 倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱。放置在 ℃冰箱中保存。 (5)几天后取出冰箱中该固定化酶柱，重复实验，观察结果。 4．实验结果的比较 【典例剖析】 如图是固定化酶反应柱，请回答下列 问题。 (1)将α-淀粉酶溶于水中，再加入石英砂，不时 搅拌，这样α-淀粉酶就可以固定在石英砂上。这 种固定化的方法称为____。 A．吸附法　　　　　　 B．共价偶联法 C．交联法 D．包埋法 (2)30 min后，装入如图所示的反应器中，构成固定化酶反应柱，并用10倍体积的蒸馏水洗涤此反应柱，洗涤的目的是___________________________________。 洗涤时，蒸馏水流速________(填“能”或“不能”)过快。 (3)实验时，将此反应柱固定在支架上，用滴管滴加可溶性淀粉溶液，并以0.3 mL/min的流速过柱，控制流速的目的是_____________，在流出5 mL后接收0.5 mL流出液，加入1～2滴_______，观察颜色。为了使观察到的颜色变化明显，可_____后再观察。如果溶液呈红色，说明淀粉水解成为______。 (4)实验后