分子生物学 研究方法-上课件.pptVIP

PCR的基本原理 PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 基因工程基本操作步骤：“分、切、连、转、筛” 基因组文库的构建步骤 1.6.1 基因组文库 基因组文库: 含有某种生物全部遗传信息的重组DNA分子的克隆总体。 基因组文库的规模：N = ln（1–p）/ln（1-f） 上式中，N：克隆数；p：某DNA片段在基因文库中出现的概率；f：插入片段的平均大小与基因组大小的比值。 1.6.2 cDNA文库 从一定生长阶段的某种细胞或组织分离得到的总mRNA反转录成总cDNA，插入到克隆载体，然后再将cDNA重组子转移到宿主细胞中进行增殖。通过上述方法所获得的无性繁殖系即为cDNA文库。 cDNA文库构建步骤 与cDNA克隆或文库构建有关的几个问题 cDNA的概念：第一链cDNA；cDNA基因；cDNA编码序列。 mRNA质量的检测：根据甲醛变性胶电泳的rRNA的带型进行判定。 mRNA的纯化：0ligo（dT）-纤维素柱层析；抗生