生理代谢参数RQ在指导发酵过程优化中的应用.PDFVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１３，３３（２）：８８９５ 生理代谢参数ＲＱ在指导发酵过程优化中的应用 １，２ ２ ２ 王　萍 　王泽建 　张嗣良 （１河北医科大学西山校区　石家庄　０５００２１　２华东理工大学生物反应器国家重点实验室 国家生化工程技术研究中心　上海　２００２３７） 摘要　过程在线参数检测是进行发酵过程工程优化控制的基础。呼吸熵 ＲＱ是微生物胞内微观 代谢流在宏观代谢参数上的响应，反映了微生物培养过程中底物的利用情况、产物和副产物的合 成情况、及微观代谢途径通量的变化。结合发酵葡萄糖酸、２，３丁二醇谷氨酸、柠檬酸、头孢菌素 Ｃ、毕赤酵母 干扰素产品的工业生产过程，分析了以微生物胞内微观代谢与宏观的生理参数ＲＱ α 为指导的发酵工艺优化策略。ＲＱ值在发酵过程中可以根据尾气数据进行在线采集，对指导通过 宏观代谢参数的调控来最优化微生物胞内的代谢途经通量，提高目的产物的产率具有非常重要 的意义。 关键词　发酵过程　微观代谢　宏观代谢　呼吸熵　优化 中图分类号　Ｑ８１９ 　　随着环境污染的不断加剧、原材料成本和动力消 代谢途径通量分布情况和衡量发酵水平的重要指 耗成本的增加，我国的有机酸、氨基酸、维生素、抗生 标［４５］。ＯＵＲ和ＣＥＲ参数在新型工业发酵生产中很容 素、多糖和生物燃料等微生物发酵生产行业市场竞争 易实现在线测量，因此我们就可以得到实时的ＲＱ值变 日益激烈，发酵过程工艺的优化控制技术越来越成为 化趋势来确定发酵过程的代谢情况，它是我们将宏观 ［１］ 代谢尺度和胞内微观代谢尺度相结合来研究和指导发 提高发酵产品竞争力的关键 。过程参数是进行发酵 ［６］ 过程优化控制技术研究的基础，根据测定方式的不同 酵过程优化控制的纽带 。通过工艺的调整来维持发 分为在线参数和离线参数，在线参数主要有溶氧、ｐＨ、 酵过程中合适的ＲＱ值，就能够很好地控制发酵过程中 在线活菌量、氧化还原电位、氧消耗速率（ＯＵＲ）、二氧 微观代谢途径通量的变化，促进产物的产率和底物转 化碳释放速率（ＣＥＲ）和呼吸熵（ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｑｕｏｔｉｅｎｔ， 化率，最大限度地减少副产物的积累，提高发酵水 ［７］ ＲＱ）等，离线参数主要包括残留底物浓度、产物、副产 平 。 物浓度及比合成速率等［２３］。 １　发酵过程中ＲＱ的概念及影响因素 　　发酵工业的发展研究表明，停留在以反应器尺度 参数（ｐＨ、溶氧、底物浓度、温度、转速、通气量等）调控 　　随着发酵过程装备技术的不断发展，尾气采集分 上的优化及放大工艺研究存在很大的技术局限性。在 析系统逐渐成为了微生物发酵生产过程检测与控制的 微生物发酵过程中，从微观代谢的角度了解细胞内部 重要检测仪器。与传统的基于溶氧电极、ｐＨ电极、氧 代谢物质流情况，并对整个发酵过程进行有效及时的 化还原电极、在线活菌浓仪的检测相比，通过尾气分析 工艺调控是非常重要的。在需氧微生物发酵过程中， 得到的参数ＯＵＲ和ＣＥＲ反映了微生物的呼吸代谢情 呼吸熵是细胞代谢过程中ＣＯ 释放速率与氧消耗速率 况，能更加深入地揭示微生物的生理特性，尤其是得到 ２ 的比值，是反映发酵过程中微生物生理代谢状态、胞内 的微生物呼吸熵 ＲＱ，反映了菌体的生理代谢状态，揭 示了发酵过程微观代谢途径通量的变化，是微生物菌 收稿日期：２０１２１２０３　　修回日期：２０１３０１０２