(三)与酶连接的受体(Enzymelinkedreceptor).ppt

酶连接的受体介导的信号转导(Enzyme linked receptor) 一、受体酪氨酸激酶及RTK-Ras蛋白信号通路 二、细胞表面其他与酶偶的受体 三、细胞表面耦联蛋白介质的信号转导 （三）受体酪氨酸激酶(RTKs)的二聚化(dimerization)  与自磷酸化(autophosphorylation) 过程 受体和配体的结合引发构象改变，导致受体二聚化（dimerization)形成同源或异源二聚体 单体性配体:与细胞外基质带负电荷的多糖组分肝素表面紧密结合,增强受体-配体聚合化的复合物 配体是二聚体:两个单体受体直接聚在一起 没有激素的情况下形成二硫键连接的二聚体 2. 自磷酸化(autophosphorylation) 受体二聚化后，激活受体的蛋白酪氨酸激酶活性 二聚体内彼此交叉磷酸化（Cross-phosphorylation)受体胞内肽段的一个或多个氨基酸残基，也称受体的自磷酸化。 构象改变，有利于ATP、蛋白底物的结合 激活的RTKs内，磷酸酪氨酸残基作为多种下游信号传递相关蛋白所识别并结合，启动信号传导。 3. 活化的RTKs： 可与胞内溶质中带有SH2结构域的结合蛋白或信号蛋白； ①接头蛋白（adaptor protein）：如生长因子受 体结合蛋白-2(GRB-2)等， 作用：偶联活化受体与其它信号分子参与构成信 号转导复合物不具酶活性，无传递信号性质 ②信号通路中有关的酶： 如GAP(GTP酶活化蛋 白,GPTase activating protein)、磷脂酰肌醇代 谢有关的酶等 两类PTK蛋白的结构和功能不同，但都具有高度保守而无催化活性的结构域，即SH2和SH3结构域。 （四） RTK- Ras信号通路1.Ras蛋白 大鼠肉瘤(rat sarcoma, Ras) ras基因表达产物 Ras是小的GTP结合蛋白, 具有GTPase活性 Ras+GTP,活化态; Ras+GDP, 失活态, Ras从失活态到激活态,先要释放GDP才会有GTP的结合, GDP的释放需要鸟苷酸释放因子(GRF)参与; GTP酶活化蛋白GAP促进Ras的活化态到失活态; GAPGRF都与Ras蛋白参与的信号转导相关。 Ras蛋白具有分子开关作用。 2.Ras的活性受两个主要蛋白的控制， 一个是鸟苷交换因子(guanine nucleotide exchange factor， GEF)， 作用：促使GDP从Ras蛋白上释放出来，取而代之的是GTP，从而将Ras激活，GEF的活性受生长因子及其受体的影响。 另一个控制Ras蛋白活性的是GTP酶激活蛋白(GTPase activating protein， GAP)，存在于正常细胞中， 作用：激活Ras蛋白的GTP酶，将结合在Ras蛋白上的 GTP水解成GDP，成为失活型的 Ras蛋白—GDP。 GAP (GTP酶活化蛋白, GPTase activating protein,GAP) 具有SH2结构域,可直接与活化的受体结合 促进Ras蛋白从活化态到失活态的转变 GRF（鸟苷酸释放因子） 具有SH3结构域,不能直接和受体结合,配体激活 受体接头蛋白通过SH2与受体的磷酸酪氨酸残基 结合,在通过SH3与GRF结合, GRF与膜上的Ras接触，从而活化Ras。 3.RKT-Ras途径特点 Ras具有二种鸟嘌呤结合形式。 与GTP结合活化形式及与GDP结合失活形式的转换完成信号转导过程； Ras具有内源GTPase活性，由它完成GTP-GDP的转换，结束一次信号传递过程； Ras主要受酪氨酸蛋白激酶调节，需adapter和鸟苷酸释放因子(GRFs)的中介； Adapter连接酪氨酸蛋白酶与GRFs, GRFs作用于Ras,使其释放GDP，结合上GTP； Ras结合上GTP后，GTPase活性很低，达不到生理条件水解GTP、水解Ras的速率；? 需要GTP酶激活蛋白(GTPase activating proteins, GAPs)如Raf,Raf是丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)蛋白激酶(又称MAPKKK）的催化下，迅速水解GTP，从而结束其功能。另一方面通过GAPs将信号传递到下游； GRFs 和GAPs分别起启动及终止其活性的作用。 Ras一旦被Raf活化，就作为MAPKKK将MAPKK磷酸化激活，进入MAPK磷酸化活化。 MAPK通过两种途径将转录因子磷酸化，MAPK进入核内调节与生长有关的基因转录。 二、细胞表面其他酶连接 受体丝氨酸/苏氨酸激酶 受体酪氨酸磷酸