实验1特殊显微镜结构及操作技术-中国显微图像网.ppt

实验1 特殊显微镜结构及操作技术 【目的】 了解TE2000-U型倒置显微镜的基本组件、原理，掌握其基本操作。 【材料】 1．高等动、植物各类组织永久制片； 2．培养皿（瓶）中的活细胞或微生物； 3．口腔上皮细胞的临时装片。 【实验用品】 1．试剂：10μg/mL罗丹明123的磷酸缓冲液（PBS）荧光染料。 2．器材：倒置显微镜，相差显微镜附件（相差物镜、转盘聚光器、对中环形光阑和绿色滤色镜等），微分干涉显微镜附件（起偏镜、检偏镜和渥拉斯顿棱镜等），荧光显微镜附件（荧光发射器、激发滤片和阻断滤片等），载玻片，盖玻片，牙签，滤纸条，擦镜纸，镊子，滴管。 【实验原理和方法】 倒置显微镜是一种用于生物组织细胞离体培养观察的光学显微装置，能直接对培养皿、培养瓶的标本进行显微观察。由于它的物镜、物体和光源位置刚好与立式显微镜颠倒，被称为倒置显微镜。倒置显微镜的物镜在下，聚光器在上，被观察样品置于位于上方的聚光器之下，聚光器具有远大于物镜的工作距离。因此，适应于培养皿或培养瓶中样品的观察。高档倒置显微镜可根据不同观察要求，增加相差、微分干涉反差物镜或荧光发射装置，构建成相差显微镜、微分干涉显微镜或荧光显微镜。 一、倒置显微镜的构造与使用 （一）倒置显微镜的构造 倒置显微镜由目镜、透射照明器、聚光器、载物台、物镜和显微镜机体等部件构成，以TE2000-U显微镜为例介绍。 TE2000-U 显微镜配有：T-DH 100W 透射照明器、LHS-H100P-1 12V100W 灯室、12V100W 卤素灯、TE2-PS100W 电源、T-SR 矩形载物台、T-TD 双目镜筒D、CFI 10X 目镜、T-N6 六孔物镜转换器，系统聚光器、物镜、电源线等。 1. 目镜筒及目镜 A:屈光度调节环 B:目镜 C:目镜筒转盘O:开 B:勃氏镜(带有聚焦螺钉) C:关(光闸) M:2.5 倍放大 2. 显微镜机体 3. 透射照明器: 透射照明器必须根据规定使用灯泡(12V100W 或6V30W)。T-DH 100W 透射照明器需灯室。 A： 视场光阑调节杆 B： 滤色片滑片 C： 聚光器再聚焦制动器 D： 聚光器调焦旋钮 E： 聚光器固定螺钉 F： 聚光器安装定位孔 G： 聚光器安装定位槽 H： 聚光器转动指紧螺钉 I： 聚光器调中螺钉 J： 聚光器安装(可转动)支架 K： LHS-H100P-1 12V100W 灯室 L： 灯室固定螺钉 M： 灯室盖指紧螺钉 N： 聚光器支架(可移动) O： 聚光器支架指紧螺钉 P： 灯室线 Q： 聚光器支架下降定位螺钉 T-DS 30W 透射照明器 A： 防尘滑片(可移动) B： F 堵口滑片(可移动) C： 聚光器安装支架 D： 6V30W 灯室 E： 滤色片滑片 F： 安装附加装置M4 螺纹孔 系统聚光器 T-DS 30W透射照明器(霍夫曼观察) ELWD-S 聚光器 SLWD 聚光器 T-SR矩形载物台 （二）由TE2000-U，100W 透射照明器，系统聚光器，以及T-TD 目镜筒D 组成的显微镜系统。 明视场(BF)镜检 关键点： 从光路中卸下其它形式观察需要的所有光学组件，聚光器调节好（调节聚焦和对中），转动孔径光阑调节好像的清晰度。 1. 复位 1） 逆时针转动，松开透射照明器中的“聚光器再聚焦指紧螺钉”。 2） 把“目镜筒转盘”设置到＜O＞位。 3） 把显微镜右侧的“中间放大倍数刻度盘”打到＜1X＞。 4） 逆时针转动，松开显微镜右侧粗∕微调旋钮后面的“物镜再聚焦定位环” 2. 打开透射照明器 1） 把电源后部的“外部开关”打到开的位置； 2） 把电源“电源开关”打开。(把开关拨至│)； 3） 按下显微镜左侧的“照明器开关”接通灯泡。 3. 调节灯泡亮度保证色彩真实。 1） 把显微镜左侧的“亮度调节盘”设置成＜12V100W＞； 2） 把透射照明器中的“NCB11 滤色片”插入光路中； 3） 把透射照明器中的“ND4 滤色片”插入光路中。 4. 调节光路 1） 把10X 物镜转到光路中。 2） 把显微镜右侧的“光路转换盘”转到＜1＞的位置。（100%光到观察口） 3） 向上推透射照明器上的“视场光阑杆”完全打开视场光阑。 4） 将系统聚光器上的“孔径光阑杆”转至右侧极限处把“孔径光阑”完全打开。 5） 转动聚光器调焦旋钮把聚光器调至最低位置。 5. 明视场观察时对显微镜的调整 把“聚光器转盘”转到＜A＞位置。 6．调节视度及瞳距 1）将显微镜前部的“摄影取景框转盘”逆时针旋转，使摄影取景框进入光路。 2）用左眼对着左侧目