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实验室生物安全 绍兴市疾病预防控制中心 何婷婷 2015年12月 实验室生物安全概论 实验室生物安全防护的基本原则 感染性物质的运输 实验室生物安全应急体系与意外事故应对 实验室生物安全防护的基本原则 安全设备和个体防护 实验室设计与建造的特殊要求 安全操作规程 致病微生物及其毒素在实验室之间的传递 管理制度 微生物危害评估 总则 1. 实验室生物安全防护的内容包括安全设备、个体防护装置和措施,实验室的特殊设计和建设要求,严格的管理制度和标准化的操作程序及规程。 2. 应将每一特定实验室从立项、建设到使用维护的全过程中有关生物安全防护综合措施的内容编入实验室的生物安全手册中。必须设有专职的生物安全负责人。 3. 生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分为四个生物安全防护级别。 安全设备和个体防护 安全设备和个体防护是确保实验室工作人员与致病微生物及其毒素直接接触的一级屏障。 1. 生物安全柜是最重要的安全设备,形成最主要的防护屏障。实验室应按要求分别配备Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级生物安全柜。所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气溶胶的操作,除实际上不可实施外,都必须在生物安全柜内进行。不得用超净工作台代替生物安全柜。 安全设备和个体防护 2. 必要时实验室应配备其他安全设备,如设置配有排风净化装置的排气罩等,或采用其他不使致病微生物逸出确保安全的设备。 3. 实验室所配备的离心机应在生物安全柜或其他安全设备中使用,否则必须使用安全密封的专用离心杯。 4. 必须给实验室工作人员配备必要的个体防护用品。 生物安全柜是一种负压的净化工作台,正确操作生物安全柜,能够完全保护工作人员、受试样品并防止交叉污染的发生;而超净工作台只是保护操作对象而不保护工作人员和实验室环境的洁净工作台。因此,在微生物学和生物医学的科研、教学、临床检验和生产中,应该选择和使用生物安全柜,而不能够选择和使用超净工作台。 生物安全柜的分类 根据生物安全防护水平的差异,生物安全柜可分为一级、二级和三级三种类型。一级生物安全柜可保护工作人员和环境而不保护样品。其气流原理和实验室通风橱基本相同,不同之处在于排气口安装有HEPA 过滤器,将外排气流过滤进而防止微生物气溶胶扩散造成污染。一级生物安全柜本身无风机,依赖外接通风管中的风机带动气流,由于不能保护柜内产品,目前已较少使用。 二级生物安全柜是目前应用最为广泛的柜型。按照《中华人民共和国医药行业标准YY0569-2005生物安全柜》中的规定,二级生物安全柜依照入口气流风速、排气方式和循环方式可分为4 个级别:A1 型,A2 型,B1 型和B2 型。所有的二级生物安全柜都可提供工作人员、环境和产品的保护。 A1 型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.38m/s。无内部循环气流,100%的气体通过排气口过滤排出。A2 型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s。70%气体通过HEPA 过滤器再循环至工作区,30%的气体通过排气口过滤排出。 二级B型生物安全柜均为连接排气系统的安全柜。连接安全柜排气导管的风机连接紧急供应电源,目的在断电下仍可保持安全柜负压,以免危险气体泄漏如实验室。其前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s(100fpm)。 B1 型70%气体通过排气口HEPA 过滤器排除,30%的气体通过供气口HEPA 过滤器再循环至工作区。B2 型为100%全排型安全柜,无内部循环气流,可同时提供生物性和化学性的安全控制,可以操作挥发性化学品和挥发性核放射物作为添加剂的微生物实验。 三级生物安全柜是为生物安全防护等级为4级实 验室而设计的,柜体完全气密,工作人员通过连接 在柜体的手套进行操作,俗称手套箱(Golve box),试验品通过双门的传递箱进出安全柜以确保 不受污染,适用于高风险的生物试验,如进行 SARS、埃博拉病毒相关实验等。 实验室设计与建造的特殊要求 包括: 实验室的选址、平面布置、围护结构、通风 空调、安全装置及特殊设备等设计与建造的 特殊要求。 安全操作规程 1. 针对不同等级的生物安全防护实验室所 规定的安全操作规程,包括标准的安全操作 规程和特殊的安全操作规程,必须在实验室 的生物安全手册中明列并加以执行。 2. 针对不同的微生物及其毒素应补充规定 相应的特殊安全操作规程,也应在各实验室 的生物安全手册中明列并加以执行。 致病微生物及其毒素在实验室之间的传递 致病微生物及其毒素在实验室之间的传递 必须严格按照国家现行有关管理办法执行。 管理制度 实验室基本管理 实验室特殊管理 实验室基本管理 1 实验室内的布置和准入 a)在主实验室应合理设置清洁区、半污染区和污染区; b)
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