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第九章 分子育种 2009年12月 第十章 植物新品种登录、审定与保护 2009年12月 * * 第一节 基因工程 一、植物基因工程的概念及其研究概况 概念：运用分子生物学技术，根据育种目标，将不同生物的DNA在体外经酶切和连接，构成重组DNA分子，然后通过载体或直接导入受体细胞，使外源基因在受体细胞中得到复制和表达，最后从转化细胞中筛选有价值的类型并培育出工程植株，从而创造新品种的定向育种新技术。 二、植物基因工程的一般程序和方法 （一）目的基因的分离与克隆 1、鸟枪法 2、mRNA分离（逆转录法） 3、插入突变技术（转座子标签法 T-DNA标签法） （二）植物表达载体的构建 （三）植物的遗传转化 1、农杆菌介导转化 （1）单感染法 （2）共感染法 （3）叶盘法 2、DNA的理化转移方法 （1）化学刺激质粒进入原生质体 （2）电融合法 （3）微注射 （4）基因枪法 3、种质系统转化 （1）花粉管通道法 （2）子房、胚囊注射法 （3）生殖细胞浸泡法 基因枪 （四）转基因植株的检测与鉴定 1、要求有严格的对照（包括阳性和阴性对照） 2、转化当代要提供外源基因整合和表达的分子生物学证据与表现型数据（Southern杂交、Northern杂交、Western杂交、酶活性） 3、外源基因控制的表现型证据 4、外源基因稳定遗传的证据 三、基因工程在园林植物育种上的应用 目前在花色、花型、花香、花期、株型、花朵的衰老、抗病虫、抗逆性等性状改良方面表现出广阔的应用前景。 第二节 分子标记及其在育种中的应用 一、分子标记 （一）分子标记的种类 1、以DNA杂交为基础的分子标记 2、以PCR技术为基础的分子标记 3、PCR技术和限制性内切酶技术相结合的分子标记 （二）分子标记技术及其特点 1、RFLP（restriction fragment length polymorphism ）标记技术 2、RAPD（random amplified polymorphismic DNA）标记技术 3、AFLP（amplified fragment length polymorphism）标记技术 4、SSR（simple sequence repeats）标记技术 RAPD电泳结果 二、分子标记在育种中的应用 （二）分子标记与亲本的选择 （三）分子标记与育种过程监测和个体的鉴定 （四）分子标记与遗传多样性 （五）分子标记与品种鉴别 （六）分子标记的筛选 （一）分子标记基因定位与分子遗传图 第一节 植物新品种的登录 一、园林植物新品种登录概况 二、品种登录程序 （一）由育种者向国际登录权威提出登录申请。 （二）登录权威对申请者提供的材料进行书面审查。 （三）颁发登录证书，并公开发表新品种。 三、品种登录的作用 第二节 品种审定、 一、品种审定的概况 二、品种审定的内容 （一）申报条件 （二）申报材料 （三）审定标准 第三节 植物新品种保护 一、品种保护的概况 二、品种权：由国家植物新品种保护审批机关依照法律、法规的规定，赋予品种权人对其新品种的经济权利和精神权利的总称。 三、品种保护范围 中华人民共和国植物新品种保护名录第一批（1999年） 1．毛白杨 Populus　tomentosa　Carr. 5.牡丹 Paeonia　suffruticosa　Andr． 2．泡桐属　Paulownia 6.梅　Prunus　mume3．杉木　　Cunninghamia　Lanceolata 7．蔷薇属　Rosa4．木兰属　Magnolia 8．山茶属　Camellia 中华人民共和国植物新品种保护名录第二批（2000年） １．杨属　　　Ｐｏｐｕｌｕｓ２．柳属　　　Ｓａｌｉｘ３．桉属　　　ＥｕｃａｌｙＰｔｕｓ４．板栗　　　Ｃａｓｔａｎｅａ　ｍｏｌｌｉｓｓｉｍａ５．核桃属　　Ｊｕｇｌａｎｃｅ６．枣　　　　Ｚｉｚｙｐｈｕｓ　ｊｕｊｕｂａ７．柿　　　　Ｄｉｏｓｐｙｒｏｓ　ｋａｋｉ８．杏　　　　Ｐｒｕｎｕｓ　ａｒｍｅｎｉａｃａ９．银杏　　　Ｇｉｎｋｇｏ　ｂｉｌｏｂａ１０．油桐属　Ｖｅｒｎｉｃｉａ１１．红豆杉属　　Ｔａｘｕｓ１２．杜鹃花属　　Ｒｈｏｄｏｄｅｎｄｒｏｎ１３．桃花　　　　Ｐｒｕｎｕｓ　ｐｅｒｓｉｃａ１４．紫薇　　　　Ｌａｇｅｒｓｔｒｏｅｍｉａ　ｉｎｄｉｃａ１５．榆叶梅　　　Ｐｒｕｎｕｓ