双歧杆菌的生长曲线测定及其氧浓度对细胞浓度的影响概要.ppt

双歧杆菌的生长曲线测定 及其氧对细胞浓度的影响 班级： 11生物技术1班 学生：陈婷 指导老师：江胜滔  一. 双歧杆菌的概况 双歧杆菌 (Bifidobacterium)是由法国学者Henry Tissierz 在1899年从母乳营养儿的粪便中分离出的一种厌氧的革兰氏阳性杆菌，末端常常分叉，故名双歧杆菌。 二.研究的目的与意义 本实验针对双歧杆菌为研究对象，通过菌种活化来探究双歧杆菌的生长曲线以及双歧杆菌在不同装液量的耐氧性。对今后的双歧杆菌的保存有了实际意义，而且使用方便，降低了双歧杆菌的制作成本，对开发动物饲料添加剂提供理论依据。 三.实验方案 通过探究双歧杆菌的生长曲线、培养基不同的装液量对细胞数的影响测定其耐氧性。 四.实验步骤 1.菌种活化 2.生长曲线的测定　 3.双歧杆菌耐氧性测定 五.结果与分析 1 .菌种形态观察 双歧杆菌是一类多形态的杆菌，常呈现Y字型、V字型、L型、弯曲状勺状等形态，其形态多变，不同种、不同生长时期、不同生长环境下均呈现出不同的形态。 2.生长曲线的特性分析 在培养条件不变的情况下，定时取样计数细胞数，以培养时间为横坐标，以细胞数为纵坐标可形成一条生长曲线。 如图3-4所示，2-12h 处于生长期，10-12h 处于稳定期最大值为 10.7*105CFU/mL，12h 后进入衰亡期。 3.双歧杆菌耐氧情况 装液量为3ml试管中细胞数在0-12h双歧杆菌处于衰亡期，细胞数不断减少从2.1*107CFU/mL-0.72*107CFU/mL.但在12-18h细胞数有增长趋势。 装液量为5ml试管中细胞数在0-12h双歧杆菌处于衰亡期，细胞数不断减少从1.28*107-0.54*107CFU/mL.但12-18h细胞数有增长趋势。 装液量为7ml试管中细胞数在0-6h双歧杆菌处于衰亡期，菌种数不断减少从2.7*107CFU/mL-0.44*107CFU/mL.但6-18h菌种数有微弱增长趋势。 装液量为9ml试管中细胞数在0-3h双歧杆菌处于衰亡期，菌种数不断减少从2.7*107-1.1*107CFU/mL.但3h之后菌细胞处于生长期不断增长。 装液量为11ml试管中细胞数在0h-3h双歧杆菌处于衰亡期，细胞数不断减少从2.7*107CFU/mL-1.12*107CFU/mL.但3h之后细胞数处于生长期不断增长。 装液量为13ml试管中细胞数在0-3h双歧杆菌处于衰亡期，细胞数不断减少从2.7*107-1.8*107CFU/mL.但3h之后细胞数处于生长期不断增长。 如图所示培养基装液量为13ml试管最适合菌种生长，双歧杆菌细胞数最多。 如图所示，在培养基为3ml-9ml的试管中，培养液清澈没有沉淀。而接种管在培养基为11ml、13ml的试管中，经过培养后，培养液清澈，管底大量菌体沉淀，且培养基装液量为13ml的试管产生物量最多。可判断双歧杆菌为厌氧菌 。 六.结论 双歧杆菌在装液量为3ml、5ml的试管有增长趋势。 是因为双歧杆菌在需氧条件下，形成专性厌氧菌，在刚分离时厌氧性特别强，但有的菌株经过传代后，或经过需氧厌氧交替培养可变成兼性厌氧或微需氧状态。 培养基装液量为7ml的试管中的细胞数有微弱的增长趋势。第一方面是因为双歧杆菌装液量为一半时，菌种适应新的环境，形成专性厌氧、兼性厌氧、以及耐氧菌，菌种之间相互竞争，所以菌种细胞数含量较少。另一方面因为微生物也能合成那些环境中缺乏的成分并改变其生物合成活性以应对环境中营养状况的变化。在众多机制中。NADH氧化酶和NADH过氧化物酶是双歧杆菌耐氧的关键。 培养基装液量为13ml的试管最适合菌种生长。 本实验不足：因为实验的时间不够长，不能准确的测到双歧杆菌的生长情况。而且在实验过程中没有完全消毒，操作不熟练等易造成实验误差。 谢 谢！ * 图2-1 菌种培养 *