标准名称-北京市卫生信息网.doc

DB?? 北京市食品安全地方标准 DB 11/ XXXXX—XXXX ????? 食品安全地方标准 动物性食品中(2-受体激动剂残留检测 液相色谱-串联质谱法 ????? （征求意见稿） ????? XXXX - XX - XX发布 XXXX - XX - XX实施 北京市卫生和计划生育委员会???发布 前??言 本标准为首次发布。 主要起草单位：北京市疾病预防控制中心。 主要起草人：、、、、、等。食品安全地方标准 动物性食品中(2-受体激动剂残留检测 液相色谱-串联质谱法 范围 本标准规定了6种(2-受体激动剂的液相色谱串联质谱的检测方法。 本标准适用于猪牛羊肉制品中6种(2-受体激动剂的测定。 原理 动物性食品样品经酶解提取后，经MCX柱净化，浓缩复溶后经液相色谱/串联质谱仪测定，结合内标法峰面积定量。 试剂和材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1甲醇（CH3OH，色谱纯） 3.1.2乙酸（CH3COOH，色谱纯） 3.1.3氨水（NH3·H2O，优级纯，浓度25％～28％） 3.1.4甲酸甲酸 (HCOOH，色谱纯， 99%) 3.1.5乙酸钠（NaAc·4H2O，色谱纯） 3.1.6盐酸（HCl，分析纯） 3.1.7 β-葡萄糖苷酸酶/芳基硫酸酯酶（β-Glucuronidase/Arylsulfatase，100000 unit/mL） 3.1.8 混合型阳离子交换固相萃取小柱(500mg, 6mL, Waters Co.)（或其他公司等效柱） 3.2 试剂配制 3.2.1 0.1％甲酸水溶液：量取1 mL甲酸，用纯水定容至1000 mL 3.2.2 3%甲醇氨溶液：量取3 mL氨水，用甲醇定容至100 mL 3.2.3 乙酸-乙酸钠缓冲溶液（pH 5.2）：称取43.0 g NaAC·4H2O，加入25 mL乙酸，用水溶解并定容到1000 mL，用乙酸调节pH到5.2。 3.2.4 1%盐酸甲醇：量取盐酸1 mL, 用甲醇定容至100 mL 3.3 标准品 3.3.1 (2-受体激动剂标准 可乐定（Clonidine）、赛庚啶（Cyproheptadine）、溴莫尼定（Brimonidine）、替扎尼定（Tizanidine）、胍法辛（Guanfacine）、胍那苄（Guanabcnz）。以上各标准品的纯度均大于90.0%，购自sigma公司。 3.3.2 (2-受体激动剂内标 D4-可乐定（D4-Clonidine）、D4-溴莫尼定（D4-Brimonidine）、D4-替扎尼定（D4-Tizanidine）、C13-N15-胍法辛（C13-N15-Guanfacine）。以上标准品均购自TRC公司 3.4 标准溶液配制 3.4.1 标准储备溶液： 精确称取3.3的标准品各0.0100 g，分别用甲醇溶解并定容至10 mL，浓度为1000 mg / L，-18 ℃冰箱中保存，有效期24个月。对于同位素标准品，直接用1mL甲醇溶解，制成10 mg/L的标准溶液，有效期24个月。 3.4.2中间标准工作液：根据需要，用甲醇将标准储备溶液（）配制为适当浓度的标中间准工作液。标准工作液应使用前配制。 仪器和设备 4.1 高效液相色谱-串联质谱仪 4.2 色谱柱：DIKMA Leapsil C18 色谱柱（2.7 μm， 2.1*100 mm） 4.3 电子天平感量0.001 g 4.4 组织匀浆机 4.5 漩涡混合器 4.6 冷冻离心机（最大转速高于10000 r/min） 4.7 酸度计（0.01） 4.8 氮吹仪 4.9 固相萃取装置 4.10 超声清洗仪 分析步骤 5.1试样制备 5.1.1 样品制备 制样操作过程中必须防止样品污染或残留物发生变化。 动物肌肉、肝脏、肾脏从所取全部样品中取出有代表性样品约500 g，剔除筋膜，用组织捣碎机充分捣碎均匀，装入洁净容器中，密封，并标明标记，于-18 °C以下冷冻存放。 5.1.2样品提取及酸解 精确称取匀浆的动物肌肉（肝脏或肾脏）样品约5.0 g，加入浓度为 100 (g/L的氘代同位素标准溶液20 μL，加入醋酸－醋酸钠缓冲溶液（pH=5.2）5 mL，加入5μL的β-葡萄糖苷酸酶/芳基硫酸酯酶，涡旋混均，37℃水解过夜，冷却至室温；加入1%盐酸甲醇20 mL，涡旋混均后超声提取30 min，以12000转4℃离心10 min。沉淀加入2 mL 纯水，8 mL1%盐酸甲醇，涡旋混均，重复提取一次。合并提取液，以12000转0℃离心10 min。取上清液，