动物的基本操作与半衰期的测定.ppt

* * * 实验动物基本操作与血浆药物代谢半衰期测定 基础医学院 王丹丹 E-mail:wangdan2988@126.com 实验目的 实验原理 实验动物 器材与药品 实验步骤 实验结果 注意事项 主要内容 1 实验目的 掌握动物基本操作 掌握磺胺类药物血浆药物浓度以及半衰期的测定方法 2 了解药物血浆半衰期测定及计算的临床意义 3 实验原理 实验动物：根据科学研究的需要、定向培育而成的、供科学实验需要的对象和材料。它必须有明确的生物学特征和清楚的遗传背景，并经微生物控制和特定环境下驯化培育 实验用动物：用于实验的各种动物，它包括实验动物、家禽（畜）和野生动物。 实验原理 常用试验动物的生物学特性： ㈠ 青蛙和蟾蜍 ㈡ 小白鼠 ㈢ 家兔 ㈣ 大白鼠 ㈤ 其它 如猫、狗 实验原理 Free Bound 组织器官 体循环 吸收 游离型药 结合型药 代谢物 分布 排泄 生物转化 A D M E 1.多数药物在体内按一级动力学规律消除,静脉注射后，如以血浆药物浓度的对数值为纵坐标，时间为横坐标，其时量关系常呈直线。 2.药物血浆半衰期（half life，T1/2）为： Ke = 2.303(logC1-logC2)/t2-t1 3.呈色原理： 磺胺类药物在酸性溶液中，与亚硝酸钠起重氮反应，生成重 氮盐。此重氮盐在碱性溶液中与酚类化合物起偶联反应，生 成橙红色的偶氮化合物。 偶氮化合物的显色深浅与磺胺的浓度有关。 实验对象 小白鼠、家兔  药品与器材 药品：20%乌拉坦，生理盐水 20%磺胺嘧啶钠溶液、1%肝素钠溶液、0.02%磺胺嘧啶钠溶液、7.5%三氯醋酸溶液、0.5%亚硝酸钠溶液、0.5%麝香草酚溶液、20%NaOH溶液、20%乌拉坦溶液、蒸馏水 器材：婴儿秤，兔台，小鼠灌胃器、哺乳动物手术器械一套，气管插管，动、静脉插管，结扎线，纱布，试管，电子天平,注射器 实验步骤 （一）小白鼠基本操作 1.抓取 2.腹腔注射 3.灌胃 4.处死 颈椎脱臼法 实验步骤 （二）家兔基本操作 1.实验准备：抓取-称重-麻醉-固定 2.气管插管 3.静脉插管 4.动脉插管 5.处死 实验步骤 1.家兔准备：抓取家兔一只，称重，用20％乌 拉坦溶液5ml/kg行耳缘静脉麻醉，然后固定 于手术台上。 角膜反射 夹趾反射 2.颈部手术 气管插管 备皮，分离皮下肌肉和组织，游离气管，穿线备用，在甲状软骨下3、4环状软骨之间做一“倒T型”切口，沿肺脏方向插入气管插管，结扎固定及二次固定。 颈外静脉插管 分离右侧颈外静脉1-2cm，穿两线备用，结扎远心端，剪一“V型”切口，静脉插管插入，结扎和二次结扎固定。 颈总动脉插管：找出一侧颈总动脉并分离约2～3cm左右，在其下穿线两根，一根结扎远心端，一端备用，对家兔进行全身肝素化：耳缘静脉注射肝素 2ml，用动脉夹夹住动脉近心端，在两线中间的动脉上剪一“V”形切口，插入肝素浸润过的动脉插管，用线结扎牢固以备取血用。 （三）代谢半衰期测定 1.取血 打开动脉夹取空白血样2ml置于用肝素浸过的试管中待用；然后由静脉注射20％的磺胺嘧啶钠溶液2ml/kg，于给药后10min及40min各取血2ml，分别置于同上试管中待用。 测定液的配制：抽取上述血液各 0.2ml，置于盛有7.5％三氯醋酸溶液 5.8ml 的试管中充分摇匀，然后以 1500r/min，离心 5min 待用。 标准液的配制：取0.02％磺胺嘧啶钠溶液0.2ml，加入7.5％三氯醋酸溶液 5.8ml 中，摇匀待用。 2.测定液和标准液的配制 * * *