实验一.培养基的制作范例.ppt

实验一 培养基的制备和灭菌 3 材料与方法 3.1.1 药品：待配各种培养基的组成成分，琼脂，1 mol/L NaOH 溶液、1 mol/L HCl溶液。 3.1.2 仪器：天平，高压蒸汽灭菌锅 3.1.3 玻璃器皿：移液管，试管，烧杯，量筒，锥形瓶，培养皿，玻璃漏斗等。 3.1.4 其它物品：药匙，称量纸，pH试纸，记号笔，棉花，纱布，线绳，牛皮纸，报纸等。 实验报告 1 用文字描述实验项目、实验目的、材料与方法（注意语言简洁、准确、突出操作的依据、使用的仪器、材料的数量、以前实验中末使用的特殊材料和注意事项。 * 1培养基的制备及灭菌 2从土壤中分离和纯化微生物 3细菌染色及形态观察 4放线菌、酵母菌和霉菌形态观察 5微生物显微计数和大小测量 6E.coli生长曲线的测定 1 科学、合理安排实验教学内容 UVL 7细菌的生理生化反应 8环境因素对微生物生长的影响 9微生物的诱变育种 抗药性突变株的筛稳定 食用真菌的采集、分离和培养 水和饮料中细菌学检查 12-13 每人任选6课时 产淀粉酶菌株的分离纯化 1培养基的制备及灭菌 2从土壤中分离和纯化微生物 1.1 掌握培养基配制的原理。 1.2 通过对牛肉膏蛋白胨培养基、高氏一号培养基、马铃薯培 养基的配制，掌握配制培养基的一般方法和步骤。 1.3 了解高压蒸汽灭菌的基本原理及操作方法。 1 实验目的 2.1 什么是培养基,一般培养基应具备哪些营养要素? 2.2 培养基有哪些类型,为什么培养不同的微生物需要的培养 基不同,培养基为什么要调节pH 值,配制好的培养基为什么 要立即灭菌? 2.3 高压蒸汽灭菌的原理是什么? 2 实验原理(通过了解下列问题来掌握实验原理) 3.1 实验器材 3.2 方法 3.2.1 称量。根据培养基的配方配制400 mL 培养基，用托盘天平 按比例称取牛肉膏? g，蛋白胨? g，NaCl ? g, ….。牛肉膏用玻 璃棒挑取，放在培养皿中称量，再用热水熔化后倒入烧杯中；蛋白 胨易吸潮，取出药品后应迅速盖上瓶盖。 3.2.2 溶化。在烧杯中加入? mL水，用玻璃棒搅匀，然后在电炉 上加热使其溶解，待溶液即将沸腾时，加入琼脂？g，边加热边 搅拌，使其熔化 。药品完全溶解后，补充水到? mL。 3.2.4 过滤。用四层沙布过滤，取其滤液。（如果培养基较澄清 ，则无需过滤。） 3.2.3 调节pH。先用精密pH 试纸测量培养基的原始pH为？，然 后用滴管向培养基中逐滴加入1 mol/L NaOH溶液，边滴加边搅拌 ，并随时用pH 试纸测定，直至pH达到？。（使用时注意节约pH 试纸，每次撕一小节进行测定，试纸不能接触比色纸） 3.2.5 分装。将培养基先分装？支试管，分装的高度为试管高度 的1/5，其余培养基分装到？个三解烧瓶中，分装量不超过三角 烧瓶容积的1/2 。分装时注意培养基不能沾到瓶口或管口。 （教师示范） 3.2.6 加塞、包扎。在装有培养基的试管口或瓶口塞上棉塞，阻 止微生物进入培养基。将同组试管共？支用报纸包扎，并用麻绳 捆扎。三角瓶外用报纸包扎后，用麻绳扎一活结。 （教师示范） 3.2.7 灭菌。将上述培养基以0.1 MPa,121℃,20 min 高压蒸 汽灭菌。 （教师分组讲解灭菌锅的结构、使用方法和注意事项） 3.2.8 搁置斜面。将灭菌的试管培养基冷至50℃左右，搁置成 斜面，斜面长度略小于试管总长度的1/2。 （教师示范） 3.2.9 无菌检查。取灭菌的培养基放入37℃培养箱中24 h,观 察是否有菌产生，以检查灭菌是否彻底。 2 实验结果。可用文字或表格描述，注意培养基的名称、数量、pH值、灭菌后的效果。 3 实验分析。你制作培养基是培养什么微生物的？是否符合要求？实验操作中存在什么问题，应如何改进？