牛蒡低聚糖GF13对荷瘤大鼠血糖的调节作用.docVIP

牛蒡低聚糖GF13对荷瘤大鼠血糖的调节作用 　　[摘要]目的 探讨牛蒡低聚糖GF13对STZ糖尿病荷瘤大鼠和低血糖荷瘤大鼠血糖稳定性的影响。方法 人工建立STZ糖尿病荷瘤大鼠1、2、3组，每组10只，按照500 mg/（kg?d）灌服5%、10%、20%的牛蒡低聚糖GF13溶液，第4天分别测空腹血糖、餐后2 h、餐后4 h血糖。另取血糖值在3.7～6.9 mmol/L的荷瘤鼠，低血糖荷瘤对照组禁食，低血糖荷瘤大鼠实验组灌服200 mg/（kg?d）的5%、10%和20%浓度的牛蒡低聚糖GF13。自第2天起，连续3 d尾部取血，测定低血糖荷瘤大鼠血糖值。结果 牛蒡低聚糖GF13对STZ荷瘤鼠的空腹血糖均有较明显的抑制作用，浓度为10%的牛蒡低聚糖GF13对餐后4 h血糖有较明显的抑制作用，达到了显著水平（P0.05）。在牛蒡低聚糖GF13对低血糖荷瘤鼠血糖的稳定性调节实验中，低血糖荷瘤实验组的血糖降低幅度较低血糖荷瘤对照组小，其中低血糖荷瘤实验3组降低的幅度最小，达到了显著水平（P0.01）。低血糖荷瘤实验2组的血糖值更接近荷瘤对照组的正常血糖值，差异有统计学意义（P0.05）。结论 牛蒡低聚糖GF13对荷瘤大鼠的血糖具有双向调节、维持血糖稳定的作用，但又不影响荷瘤大鼠的正常血糖。 　　[关键词]牛蒡低聚糖GF13；糖尿病；荷瘤大鼠；血糖调节 　　[中图分类号] R-332 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2016）08（b）-0008-04 　　血糖指标是术前麻醉的必查项目，患者血糖水平的高低，对麻醉效果以及患者手术过程中的生命体征指标有一定影响[1]，因此，手术前保证患者的血糖值相对稳定对手术麻醉的效果有重要意义[2]。本研究以STZ糖尿病荷瘤大鼠和低血糖荷瘤大鼠为实验模型，对灌服牛蒡低聚糖GF13后的血糖值进行检测，判断牛蒡低聚糖GF13对荷瘤大鼠的血糖稳定性是否具有调节作用。本研究的意义在于发现一种对患者术前血糖起到稳定作用的物质。 　　牛蒡低聚糖GF13是寡糖[3-4]的一种，是天然的、聚合度均一、分子结构明确的功能性低聚多糖，可作为防治肿瘤、结肠癌、便秘等的保健食品配料和天然药物[5-7]。据报道，牛蒡低聚糖GF13可诱导植物的抗病性，具有促进双歧杆菌生长等活性[8-9]，但其对血糖稳定性的研究报道较少。调查数据显示，我国18岁以上人群中的糖尿病患病率为11.6%，居世界第1位[10]。 　　1材料与方法 　　1.1材料 　　Wistar大鼠75只，性别不限，清洁级，重量180～220 g，购于山东大学实验动物中心。基础饲料：祖莉天竺鼠粮；高热饲料：基础饲料55%，猪油16%，蛋黄粉2%，绵白糖27%，总热量为19.93 kJ/g[11-12]。 　　1.2方法 　　1.2.1肿瘤细胞培养[13-15] 　　1.2.1.1 RPMI 1640完全培养液的配制 无血清RPMI 1640培养液中加入10%灭活过滤后的胎牛血清和1%双抗（l00 U/ml链霉素和100 U/ml青霉素），混匀，4℃保存，一周内使用。CT26结肠癌细胞生长于RPMI 1640完全培养基中，置于37℃、5% CO2细胞培养箱中培养。 　　1.2.1.2 PBS溶液配制 8.0 g NaCl，0.2 g KCl，1.56 g Na2HPO4?12H2O，0.2 g KH2PO4，ddH2O定容至1 L，高压灭菌，4℃保存。 　　1.2.1.3红细胞裂解液的配制 称取KCl 0.2 g、KH2PO4 0.2 g、NaCl 8.0 g、Na2HPO4?12H2O 1.56 g，溶于1000 ml三蒸水中，分装，高压灭菌，于4℃下保存备用。 　　1.2.2荷瘤鼠模型的建立[16] 　　配置RMPI1640培养基，此培养基中含有10%的胎牛血清和双抗（青霉素、链霉素），将CT26结肠癌细胞培养于这种培养基中，并置于温度为37℃、含有5% CO2的细胞培养箱中培养。用0.25%的胰酶消化对数生长的CT26结肠癌细胞。消化结束后，将细胞轻轻吹打下来，PBS洗两遍。用PBS稀释成2×107～6×107/ml，75%乙醇消毒大鼠右腋皮下，每只大鼠接种0.5 ml。90只Wistar大鼠接种4 d后有86只可见豆粒大小的肿瘤块，可做为荷瘤鼠模型，其余4只建模失败者剔除。 　　1.2.3牛蒡低聚糖GF13对STZ糖尿病荷瘤大鼠血糖稳定的影响 　　1.2.3.1 STZ糖尿病荷瘤模型建立[17-23] 链脲霉素（STZ）导致糖尿病的机制主要是由于胰岛细胞中烟酰胺腺嘌呤（DNA）含量减少，STZ分子中的葡萄糖基可使STZ进入胰岛β细胞，引起β细胞核内形态变化，使其染色体凝集、伸长和浓缩。其糖尿病模型操作相对