化妆品中亚苄基樟脑磺酸的标准检测方法.doc

附件6： 化妆品中亚苄基樟脑磺酸检测方法1 适用范围 本规定了采用液相色谱-紫外检测器检测法测定化妆品中亚苄基樟脑磺酸的方法。 本适用于化妆品中亚苄基樟脑磺酸的测定。 本亚苄基樟脑磺酸的3 μg / g。 2 方法原理 试样在经过提取后，经高效液相色谱分离，紫外检测器检测，根据保留时间定性，峰面积定量。 3 试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为水。 3.1 亚苄基樟脑磺酸对照品纯度＞99.0%3.2 醋酸胺。 3.3乙腈色谱纯。 3.4甲醇色谱纯。 3.5化妆品空白选择不含亚苄基樟脑磺酸的化妆品作为空白。3.6 硫酸甲醇溶液的配制精密吸取质量分数为98%浓硫酸6 mL于100mL量瓶中，加甲醇稀释至100mL，即得硫酸甲醇溶液。 3.7 亚苄基樟脑磺酸标准溶液配制 亚苄基樟脑磺酸标准储备溶液：精密称取亚苄基樟脑磺酸对照品 50mg（精确到0.01 mg）10mL量瓶中，加入硫酸甲醇溶液至10mL，即得质量浓度为5mg/mL的亚苄基樟脑磺酸标准储备溶液。 一定体积的亚苄基樟脑磺酸标准储备溶液于5mL或10 mL量瓶中，以硫酸甲醇溶液稀释并定容，得系列浓度亚苄基樟脑磺酸标准溶液。表 亚苄基樟脑磺酸系列标准溶液的配制 操作顺序 操作步骤 终浓度 1 储备液 （5mg/mL） 3 mL 5mL 3mg/mL 2 储备液 （5mg/mL） 4mL 10mL 2mg/mL 3 储备液 （5mg/mL） 2mL 10mL 1mg/mL 4 1 （3mg/mL） 2mL 10mL 600μg/mL 5 2 （2mg/mL） 1mL 10mL 200μg/mL 6 3 （1mg/mL） 1mL 10mL 100μg/mL 7 4 （600μg/mL） 1.25mL 10mL 75μg/mL 8 6 （100μg/mL） 5mL 10mL 50μg/mL 9 8 （50μg/mL） 5mL 10mL 25μg/mL 10 5 （200μg/mL） 1mL 10mL 20μg/mL 11 7 （75μg/mL） 2mL 10mL 15μg/mL 12 9 （25μg/mL） 2mL 10mL 5μg/mL 13 9 （25μg/mL） 1mL 10mL 2.5μg/mL 14 12 （5μg/mL） 1mL 10mL 0.5μg/mL 4 仪器 4.1 液相色谱仪：配有紫外检测器。 4.2 分析天平：感量0.0001g。4.3 分析天平：感量0.0001g。4.4 超声波清洗仪。 4. 离心机5 测定步骤 5.1 样品处理 准确称样品0.1g，精确至0.001g，置10 mL塑料离心管中，加硫酸甲醇溶液L，涡旋60s混匀，再加硫酸甲醇溶液mL，涡旋60s混匀，超声5min，置60℃热水浴中加热5min。待冷却到室温后，4500rpm离心10min，取上清液0.45μm微孔滤膜，滤液作为待测液备用。5.2. 色谱条件 色谱柱： C18 250mm×4.6 mm， 5μm 流动相： 20mmol/L的醋酸铵水溶液（乙酸调pH至pH5.1）-乙腈（35:65, v/v）. 检测波长：300nm. 柱温：25℃. 5. 测定取系列标准溶液分别进样10μL，以峰面积为纵坐标，标准溶液浓度为横坐标进行线性回归，建立标准曲线取“5.1”项下处理得到的待测溶液进样10μL，根据测定成分的峰面积，代入曲线上得出亚苄基樟脑磺酸的质量浓度。按“6计算”，计算试样中亚苄基樟脑磺酸的含量。 5. 平行实验 按以上步骤，对同一试样进行平行试验测定，平均偏差不超过10%。 5. 空白试样 ，按上述测定步骤进行。 6 计算 (V (（亚苄基樟脑磺酸）= ————× 100% m×106 式中：(（亚苄基樟脑磺酸）——化妆品中亚苄基樟脑磺酸的质量分数，； m ——样品取样量，g； ( ——代入准曲线上计算得到的待测样液中亚苄基樟脑磺酸的质量浓度，(g /mL； V ——样品定容体积，mL。 1