植物生理学-韩山师范学院.doc

《 植物生理学 》 综合性、设计性实验指导 陈树思 唐为萍 韩山师范学院生物系 2006年3月 不同金属离子浓度对苦瓜、芥蓝种子萌发的影响实验 [适用对象]-- 生物科学师范本科　　 [实验学时]--- 总七天，28学时 实验目的 探讨研究不同浓度、不同离子对花粉萌发的影响，掌握实验方法。使学生能独立设计实验方案，并能获得一定的分析问题、解决问题的能力。 预习与参考 预习教朝相关部分的理论知识，并参考其他相关的实验指导书及相关的研究论文。 实验内容 1.准备仪器及药品。2．种子浸泡处理。3．种子浸泡后处理。4．日常栽培管理。5．实验方法。6.实验设计与处理。7.实验数据统计与分析。 主要仪器设备功能和材料清单 （1）仪器：普通光学显微镜、恒温培养箱，小烧杯，纱布，培养皿、显微摄影仪。 （2）试剂：0.0l，0.1，1.0， 10.0m g／L的MnSO4溶液，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0， mg／LCaCl2溶液，0.5，2.0，3.0，5.0 mg/L ZnCl2溶液，双蒸水。 实验要求 自主设计，自主完成，独立分析。 实验报告要求 实验目的、实验原理、实验器材和试剂、实验材料、实验步骤、实验结果与分析。 思考题 溶液浓度对种子萌发的影响原理分析。 实验成绩评定办法 主要评分点：方案论证与设计、方案实施、调试过程、数据记录、解决问题的能力、资料搜集、实验结果、实验效果等。 不同离子浓度对九里香、五爪金龙等植物花粉萌发的影响实验 [适用对象]—生物科学师范本科　　　　　　　　　　 　　　　　 [实验学时]---总七天，28学时 实验目的 探讨研究不同浓度、不同离子对花粉萌发的影响，掌握实验方法。使学生能独立设计实验方案，并能获得一定的分析问题、解决问题的能力。 预习与参考 预习教朝相关部分的理论知识，并参考其他相关的实验指导书及相关的研究论文。 实验内容 1.准备仪器及药品。2．采集花药。3．花药处理。4．配制试剂。5．实验方法。6.实验设计与处理。7.实验数据统计与分析。 主要仪器设备功能和材料清单 （1）仪器：普通光学显微镜、恒温箱、双凹载玻片、盖玻片、镊子、显微测微尺、干燥瓶、干燥器、滤纸、电子天平、容量瓶、烧杯、滴管、显微摄影仪 （2）试剂：H3BO3、CaCl2、10%蔗糖溶液、0.5%TTC溶液（氯化三苯基四氮唑） 实验要求 自主设计，自主完成，独立分析。 实验报告要求 实验目的、实验原理、实验器材和试剂、实验材料、实验步骤、实验结果与分析。 思考题 在生产实践中如何利用花粉集体效应这一特性。 实验成绩评定办法 主要评分点：方案论证与设计、方案实施、调试过程、数据记录、解决问题的能力、资料搜集、实验结果、实验效果等。 实验方案 一. 技术路线： 配制试剂→准备仪器→采集花粉→保存处理→培养→观察→测定与统计→数据处理→分析评价→形成结论→撰写论文 二 .实验方案 准备仪器及药品： 仪器：普通光学显微镜、恒温箱、双凹载玻片、盖玻片、镊子、显微测微尺、干燥瓶、干燥器、滤纸、电子天平、容量瓶、烧杯、滴管、显微摄影仪 试剂：H3BO3、CaCl2、10%蔗糖溶液、0.5%TTC溶液（氯化三苯基四氮唑） 2．采集花药：采自广东省潮州市郊区果园，于上午8~10点左右采集刚开放或将要开放的花朵，最好是现采现用，若不能即时用，可将采集到的花药置于干燥器中，在阴凉处短时间（3天之内）保存备用。需长时间保存将花粉干燥后放入小瓶内，置于干燥器中于－20℃低温冰箱保存。 3．花药处理：将花药取出（若不是现采，应先置于室温下30min后使用），让其自然阴干，待花粉全部散出后，即可进行培养试验。 4．配制试剂：① 配制10%蔗糖水溶液作为花粉萌发的基本培养基，并作为对照组。 ② 根据计算，精确称取H3BO3的质量，移至250ml容量瓶，然后用基本培养基溶液定容，配制不同浓度的H3BO3溶液，浓度分6个水平：10 mg/L,20 mg/L,40 mg/L,60 mg/L,80 mg/L ③ 用同样方法配制不同浓度的CaCl2溶液，分为5个水平：10 mg/L,30 mg/L,50 mg/L,70 mg/L,90 mg/L 5．实验方法：采用悬液离体萌发培养法进行花粉培养 　① 花粉活力测定：采用TTC法（具体见实验指导）［培养前进行］ ② 花粉萌发率测定：采用10%蔗糖溶液为基本培养基，利用不同温度条件不同浓度水平的H3BO3溶液或CaCl2溶液，恒温培养花粉，每处理制作2片，镜检时每片随机观察10个视野，以花粉管长度为花粉率直径一半以上作为萌发标准。每处理重复实验三次，求平均值。 　③ 花粉管长度测定：花粉培养１h后，