3 高效液相色谱分析法讲解.pptVIP

3 高效液相色谱法 定义： 以液体为流动相而设计的色谱分析仪器称为液相色谱仪； 采用高压输液泵、高效固定相和高灵敏度检测器等装置的液相色谱仪称为高效液相色谱仪。 组成部分： 高压输液系统 进样系统 分离系统 检测系统 3.3 主要部件 (2) 梯度洗脱装置 (3) 进样装置 (4) 高效分离柱 (5) 液相色谱检测器 b. 光电二极管阵列检测器 c. 示差折光检测器 d. 荧光检测器 1. 流动相特性 常用正相柱：固定相为极性，官能团主要有-CN, -NH2等，后者常称为氨基柱，主要用于极性物质的分离纯化，如蛋白质、氨基酸等。 常用反相柱：固定相为非极性，最常用的有ODS柱（C-18柱）填料为十八烷基硅烷，在反相色谱可完成高效液相色谱70～80%的分析任务，在生物化学分析工作中应用的最为广泛。 2. 流动相类别 3. 流动相选择 4. 选择流动相时应注意的几个问题 有机氯农药残留量分析 5. 尺寸排斥色谱size- exclusion chromatography 高效液相色谱分析的应用 1.茶多酚的检测 高效液相条件： 色谱柱：Diamonsil C18（5um，250mm*4.6mm） 流动相：等浓度洗脱 CH3OH-H2O-TFA（23：77：0.05