细胞培养总结
Cell Culture
细胞生物学教研室
一、细胞培养技术回顾
(一)细胞培养所用制品的清洗与消毒
在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感,这些物质若有残留,会影响培养细胞的生长
微生物产品附带杂物
上次细胞残留物
非营养成分的化学物质
需要清洗的培养用品
玻璃器皿的清洗
胶塞的清洗
塑料制品的清洗
(二)细胞培养常用试剂
细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他的杂质。
需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或超纯水
1:水
2:细胞培养基
市场上可提供干粉培养基和液体培养基
常用的培养基种类
RPMI-1640、高糖DMEM、低糖DMEM、F12 等
细胞培养基应用选择
选择培养基没有一定的标准,有几点建议可供参考:
建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。
其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。
根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。
用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。
3:血清
热灭活:56℃, 30 分钟加热已完全解冻的血清
— 热灭活目的:灭活血清中的补体成分。
— 适用于细胞因子和免疫相关实验,否则建议血清不要灭活。因为热
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