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西安恒谦教育科技股份有限公司 《恒谦教育教学资源库》 教师备课、备考伴侣 专注中国基础教育资源建设 编辑发行：西安恒谦教育科技股份有限公司 全国统一客服电话：400-715-6688 《恒谦教育教学资源库》 教师备课、备考伴侣 专注中国基础教育资源建设 专题3 植物组织培养技术 了解 1.植物组织培养中各阶段的变化 2.影响植物组织培养的因素 理解 植物组织培养的基本原理和基本技术 植物组织培养的无菌操作及基本过程 一、植物组织培养的基本过程 1．原理 (1)细胞全能性：具有某种生物全套 的任何一个活细胞，都具有发育成 的能力，即每个生物细胞都具有 。植物细胞全能性表达的条件：①离体状态；②无菌操作(防止杂菌污染)；③适宜物质的诱导和调节(激素主要是生长素、细胞分裂素等) ④适宜的营养和其它条件 (2)细胞分化：在植物的个体发育过程中，细胞在 和 上出现 差异，这是在 条件下，细胞通过基因的 ，最终形成不同组织和器官的过程。 遗传信息 完整个体 全能性 形态、 结构 生理功能 稳定性 特定的时间和 空间 选择性表达 2．植物组织培养的过程 脱分化 再分化 外植体 二、影响植物组织培养的因素 1．材料 植物的 、材料的 和保存时间的 等都会影响实验结果。菊花组织培养一般选择未开花植株的 上部新萌生的 作材料。 种类 年龄 长短 茎 侧枝 2．营养 (1)无机物： 大量元素是 ； 微量元素是 。 (2)有机物：如 、维生素、烟酸、肌醇、 等。 3．激素 在培养基中需要添加 和 等植物激素，其 、使用的先后顺序、用量的 等都影响实验结果。具体情况如下 ： N、P、K、Ca、Mg、S Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 甘氨酸 蔗糖 生长素 细胞分裂素 浓度 比例 激素对植物组织培养的影响(主要是生长素和细胞分裂素) (1)使用顺序不同，结果不同。 使用顺序 实验结果 先使用生长素，后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂，但细胞不分化 先使用细胞分裂素，后使用生长素 细胞既分裂也分化 同时使用 分化频率提高 (2)两者用量的比例不同，结果不同。 用量的比例 实验结果 比例适中 促进愈伤组织的生长 生长素细胞分裂素 有利于根的分化、抑制芽的形成 生长素细胞分裂素 有利于芽的分化、抑制根的形成 4．环境因素 环境因素是指pH、温度、光照等环境条件。一般而言，菊花的组织培养所需pH为 左右，温度为 ，光照条件为每日用日光灯照射 h。 5.8 18～22℃ 12 三、实验操作 1．制备MS固体培养基（配制母液—配制培养基——灭菌） (1)母液的配制： 元素母液可配成10倍液； 元素母液可配成100倍液； 类、维生素类以及用量较小的 一般可按1 mg/mL的质量浓度单独配制成母液。 (2)配制培养基：应加入的物质有琼脂、 以及大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液，并用 定容到 mL，调节pH并分装。在菊花组织培养中，可以不添加 ，原因是菊花茎段组织培养比较容易。 (3)灭菌：分装好的培养基连同其他器械一起进行 灭菌