K562白血细胞在聚苯胺膜修饰印刷电极上的增殖与电化学行为.pdfVIP

篁垄堡全里堂堑丝兰堂垄叁望堡壅垫墨塞 皇皇丝兰竺塑堡壁塑皇竺塑坌堑丝兰 、C51K562白血细胞在聚苯胺膜修饰印刷电极上的增殖与电化 学行为 杜丹 丁霖鞠烷先木 (南京大学化学化工学院，生命分析化学教育部重点实验室，南京210093) 摘要：利用恒电位聚合法在印刷电极上制备了聚苯胺修饰膜。确定了制备聚苯 胺膜的最佳条件，用于细胞增殖与电化学行为的研究。将化学修饰电极、丝网 印刷技术与肿瘤细胞学相结合，该方法简化了电极洗涤、更新步骤，便于同一 批次细胞增殖的电化学检测。 近年来，将电化学方法用于生物学、医学领域的研究越来越引起研究者的广 泛关注，特别是发展细胞电子学、光学、电磁学性能的传感器对研制细胞微电极 体系具有重要的意义。导电高分子材料可用于许多生物分子的固定，包括酶、抗 体、半抗原、DNA、受体与全细胞【l圳，为开发新型生物传感器奠定了基础。本文 在印刷电极上制备聚苯胺(PANI)，开展了肿瘤细胞在PANI膜修饰电极上的增殖 与电化学行为的研究，为导电高分子聚合材料的应用提供了新的途径。 MPANI的HCl(1．2M)溶液中于+0．75 聚苯胺的电化学合成在含有0．2 V恒 电位氧化250S进行，得到的Ⅳ烈I膜为蓝紫色。 将培养的K562细胞稀释为1．0x105cells／mL，引入到W州I膜表面后置于含有 1640培养基(GIBCO，Grand Island，NY)、10％胎牛血清(Sigma)、100gg／mL青 oC， 5％C02的孵育箱中体外培养，在不 霉素和100扯g／mL链霉素的溶液中，于37 同时间收集细胞。 在恒电位聚合过程中，得到的PANI膜 的CV曲线随聚合电位的不同而呈不同的趋 势。当电位小于O．7V时，聚合产物为头头相 鼍 连的e．meraldine结构f4】，属线性结构，此时： 重 细胞固定不牢固，在电化学扫描过程中容易 宝 U 脱落；当电位大于O．8 V，反应容易进行，同 时聚合电流迅速上升，这是由于苯胺一旦在 电极表面聚合成膜，即可产生自催化反应， 产生网状交联结构，这样降低了PANI的单一 性【钔。由此本实验选取+0．75 图l 聚苯胺修饰印刷电极在O．2M v作为PANI的 H2S04中的循环伏安图(扫速：50 最佳成膜电位，得到的PANI膜的CV图在0．2 mV／s) M的H2S04介质中出现三对氧化还原峰(图 1)，第一对峰相对于基团阳离子的形成，第三对峰相对应于双亚胺结构，第二对 峰则反映了苯胺的氮阳离子．C6H4NHX+。 第九届全国电分析化学学术会议论文摘要集 C电化学生物传感器与生物分析化学 将K562细胞引入到 PANI／SPCE，60 h内细胞在 聚苯胺膜表面缓慢增殖， 并且保持其完好的细胞形 态，如图2所示。说明带正 电荷的氨基化表面对细胞 吸附和增殖有促进作用， 膜界面具有良好生物兼容 性，使得细胞能较好地保 持其活性。 电化学活性物质的电 子传递速率或电子传递阻 图2K562细胞在聚苯胺修饰印刷电极表面的增殖 抗与电极表面的性质密切 相关。由于细胞膜具有绝缘性，吸附于电极表面的细胞在数量、生长状况、形态 上的变化都会影响电极的界面性质(电子传递电阻、电容等)。KsFe(CN)6在SPCE 表面电子传递很快，电子传递电阻(R。，)仅为26Q，电极表面修饰了PANI膜后