2016生物一轮复习34动物细胞工程技巧.ppt

生物导弹：用癌细胞作为抗原，免疫小鼠制备抗癌细胞的单克隆抗体，并与抗癌药物连接，便制成了生物导弹，注入患者体内，借助单克隆抗体的导向作用，将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，这样既不损伤正常细胞，又减少了药剂用量。 生物导弹——单克隆抗体＋抗癌药物 单抗 癌细胞 抗癌药物 比较项目 植物体细胞杂交 单克隆抗体的制备 原理 融合前处理 促融方法 　　 用途 过 程 第一步 第二步 第三步 第四步 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性、细胞增殖 酶解法去壁 小鼠免疫处理、细胞分散 物理法　化学法 物理、化学、生物法 原生质体的制备 融合亲本细胞的准备 原生质体的融合与筛选 动物细胞融合与两次筛选 杂种细胞的形成与培养 产特定抗体的杂交瘤细胞培养 杂种植株的鉴定 单克隆抗体的分离提纯 单抗有助于疾病的诊断、治疗、预防 获得具优良性状的杂种植株 二.动物体细胞核移植和克隆动物 （一）核移植：将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，使这个新的胚胎最终发育成为动物个体。 （二）克隆动物：用核移植技术得到的动物。 克隆：通过无性生殖而产生的具有完全相同的遗传组成的一群细胞或生物的个体，克隆在希腊语中是“小树枝叶”的意思，用以指无性增殖动物，现在指个体，细胞，基因等不同水平上无性增殖动物。 （2）为什么受体细胞是卵细胞？ 细胞比较大，易操作；细胞质中含有使体细胞核全能性表达出来的所需物质。 问题深化： （1）克隆动物性状与供体动物完全一样吗？ 不是。因为：①供体动物只提供细胞核，而细胞质中的遗传物质来自于受体卵细胞；②生物的性状不仅与遗传物质有关，还受环境的影响。 （3）利用的原理： 动物细胞核具有全能性 无性繁殖 （4）这种繁殖后代的方式属于哪一类？ 是动物细胞工程技术的基础 1.动物细胞培养的条件 无菌、无毒的环境 添加一定量的抗生素，定期更换培养液 营养 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等 温度和PH 温度36.5+0.5度，pH7.2～7.4 气体环境 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） （一）动物细胞培养 动物细胞生长特性： ■细胞贴壁生长：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上生长，称为细胞贴壁。 细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止。 接触抑制 原代培养：培养第1代细胞到10代细胞 传代培养：从10代培养到40－50代细胞 细胞株：从10代到40－50代的细胞，遗传物质不变 细胞系：50代以后的细胞，遗传物质改变，具有癌变的特点，能无限增殖 几个有关概念： 注：细胞系的细胞有癌变特点，但不是癌细胞。 胰蛋白酶处理？ 取出组织 胚胎或幼龄动物器官组织 剪碎 单个细胞 细胞浮悬液 10代细胞 50代细胞 无限传代 细胞株 细胞系 遗传物质改变 2.过程： 胰蛋白酶处理？ 遗传物质未改变 细胞贴壁 思考与讨论 1、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官，请解释原因？ 2、用胰蛋白酶分散细胞，由此可说明细胞间的物质主要是什么成分？ 3、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 因为这些组织或器官，分裂能力旺盛，易于培养。 主要是蛋白质(胶原蛋白等)。 不能，因为动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体 5.植物组织培养和动物细胞培养的比较 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 培养基性质 培养基特有成分 培养结果 培养目的 细胞的全能性 细胞的增殖 固体培养基 液体培养基 蔗糖、植物激素 葡萄糖、动物血清 新植株 细胞株、细胞系 快速繁殖、培育无病毒植株等 获得细胞或细胞分泌蛋白 注：植物的培养基中也可用葡萄糖，但成本较高 生物法：灭活的仙台病毒 物理法、化学法 （二）动物细胞融合 2、过程： 1、概念：2种动物细胞→杂种细胞 制备单克隆抗体 3.植物体细胞杂交和动物细胞融合比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 融合前处理 诱导方法 用途 细胞膜的流动性、 植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 用纤维素酶、 果胶酶去壁 用胰蛋白酶 使细胞分散 物理、化学方法 物理、化学、 生物方法 获得杂种植株 主要用于制备 单克隆抗体 1.单克隆抗体概念： 2.单克隆抗体特点： 　化学性质单一、特异性强、灵敏度高 （三）单克隆抗体 单：单个细胞 克隆:无性繁殖 抗体:化学性质单一、特异性强 技术原理： 1