一种苏云金芽孢杆菌易粉碎固态培养基的生产方法.pdfVIP

发酵工程学科的进展 ——第四次奎圆发酵工程学术讨论套论文集 一种苏云金芽孢杆菌易粉碎固态培养基的生产方法 孙翠霞，弓爱君 (北京科技大学t北京100083) 摘要：在生特农药生产过程中，粉碎能耗占据了生产威本的10％以上。本文用纤维素酶 对Bt固体发酵的培养基进行前处理，得到一种易籽碎的培养基，用该培养基发酵所得产品 后处理能耗明显降低，且和原培养基发酵产品的藏价相当．证明纤维素酶的加入没有影响菌 种的生长。 关键词；苏云叠杆菌，同毒培养基}纤维素酶，糟碎 苏云金杆菌杀虫剂(Bt)是联合国粮农组织和世界卫生组织推荐，目前在世界上生产 和使用量最大的生物杀虫剂n～。与化学杀虫剂相比，其主要特点是：对人畜及其它有益 生物无害，无环境污染，害虫不易对其产生抗药性，是具有广阔应用前景的生物农药D“]。 Bt的工业发酵生产分为液体发酵和固体发酵两种。相对而言，固体发酵生产Bt的 技术，工艺简单、成本低、基本无排放，便于贮藏和运输，因此得到人们的重视和深入研 究。在固体培养基中麦麸是菌体生长的载体。为菌体生长提供营养，由亍它的物理性状 它又起着填充作用，增加稻壳和麦麸的比侧会增加物料整体的透气性，但是稻壳的加入 却给后处理带来了困难，因为稻壳的硬度太大，致使对它的粉碎要消耗巨大的能量。本 文旨在研制一种易粉碎的培养基．使其后处理的能耗降低，从而降低成本。 1材料与方法 1．1供试菌种 苏云金芽胞杆菌HD-1 1．2培养基成分 1．2．1斜面培养基 牛肉膏39，胰蛋白胨109，NaCl59，琼脂15--209，水1000mL，pH7．4 1．2．2固体发酵培养基 1．3试验仪器 752C紫外一可见分光光度计、数显光照培养箱、光照恒温振荡器、高压灭菌锅、SW- LGJ台式冷冻干燥机 1．4易粉碎固体培养基的配制 作者简介：孙翠霞(1981年一)，女，硕士研究生。从事生物农药发酵的研究 第四次全国发酵工程学术讨论会 水12．5kg。用纤维素酶处理米糠，采用3，5一二硝基水杨酸显色法测定酶解还原糖的量来 确定lkg米糠的酶解最佳条件，见图1～图4。 温度，℃ 圈1温度对米糠纤犟素酶解的影响 围2pⅡ值对米糠纤雏素南解的影响 魁紫螫 酶用置幢 田3尊用量对米糠纤堆素酶解的影响 围4碡解时间对米糠纤维素酶解的影响 农药易粉碎固态发酵培养基，编号1。 在培养基中不加人纤维素酶，其他成分不变配制培养基，编号2。 2结果与讨论 2．1粉碎效果的比较 纱布覆盖，高温灭菌。冷却后接入培养8小时种子液，用无菌玻璃棒搅拌均匀，在30C恒 温培养2天。 筛，称量过筛重，计算其占总量的百分比，比较其粉碎效果·见图5。 由图5可知，用纤维索酶酶解的培养基要比没有酶解的培养基更易粉碎，同样的粉 孙翠霞等：一种苏云金芽孢杆菌易粉碎固态培养基的生产方法 水 筮 彘 l皿 衄 盎 粉碎目数 围5未酶解和酶解培养基的粉碎效果比较 碎条件下其粉碎效果要好得多。 2．2产品的生物测定 2．2．1标准品毒力效价的测定 026pg／ml，其毒力效价为13000IU／mg。 ’ 2．2．2自制Bt产品效价的测定 对未酶解和酶解培养基在同样条件下发酵出的Bt产品进行生物测定，可得未酶解 2463，其半致死量为Lc50一5．28899／ml，其毒力效价为148140IU／mg。 3结论 先用纤维素酶处理稻谷壳，配制成培养基进行发酵，所得产品比原发